|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Техника определения группы крови при помощицоликлонов
Подготовить:
- сухое предметное стекло (типовую тарелочку) для определения группы крови;
- цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета);
- две пипетки для взятия цоликлонов из флаконов;
- две стеклянные палочки для смешивания крови пациента с цоликлонами;
- одноразовый шприц (на 5-10 мл) с иглой для взятия крови из вены пациента;
- в стерильный лоток положить 3 шарика, смоченных спиртом, 2-3 стерильные салфетки;
- резиновый жгут для внутривенных пункций;
- сухую центрифужную пробирку, на которой стеклографом отчетливо подписать фамилию пациента;
Последовательность действий:
- Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пластинку по одной большой капле (0,1) под соответствующими надписями: анти-А и анти-В.
- Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл).
- После смешивания реагентов и крови разными стеклянными палочками для анти-А и анти-В в соотношении 1:10 за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2,5 мин.
- Чтение результатов через 5 минут при помешивании капель. (от 3-х до 5 минут)
- Результат оценивается врачом. Оценка результатов реакции агглютинации с Цоликлонами анти-А и анти-В представлена в таблице, в которую также включены результаты определения агглютининов сыворотке (плазме) доноров с помощью стандартных эритроцитов.
| Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами
| Исследуемая кровь принадлежит к группе
| | анти-А
| анти-В
| | -
| -
| 0(I)
| | +
| -
| A(II)
| | -
| +
| B(III)
| | +
| +
| AB(IV)
| Соотношение эритроцитов и цоликлонов: ~0,1 цоликлонов и ~0,01 эритроцитов.
· если реакция агглютинации наступила только с анти-А цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе А(II);
- если реакция агглютинации наступила только с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе B(III);
- если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0(I);
- если реакция агглютинации наступила и с анти-А и с анти-B цоликлонами, и ее нет в контрольной капле с изотоническим раствором, то исследуемая кровь относится к группе AB(IV).
резус-фактор У 85 % людей в крови имеется еще один агглютиноген — резус фактор (Rh), а у 15 % он отсутствует. На основании этого кровь всех людей делят на резус-положительную (Rh+) и резус отрицательную (Rh-). Резус-характеристика является наследственной и постоянна в течение всей жизни. При любом переливании крови необходимо точно определить резус-принадлежность реципиента и донора.
| метод | алгоритм действий | | Метод конглютинации | Для этого исследования, кроме глазных пипеток и флакона с изотоническим раствором хлорида натрия, необходимо иметь чашки Петри, водяную баню с постоянной температурой 46—48 С и стандартные антирезусные сыворотки всех групп системы АВО. Для анализа берут антирезусную сыворотку двух серий, одногруппную по системе АВО с исследуемыми эритроцитами. В чашку Петри наносят по 2 капли антирезусной сыворотки, слева — одной серии, справа — другой в 3 ряда для 3 исследований. В каждую серию прибавляют по капле эритроцитов (исследуемые, контрольные Rh-положительные и контрольные Rh-отрицательные). После перемешивания чашку Петри помещают в водяную баню на 10 минут, после чего рассматривают в проходящем свете.
Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате, отсутствие ее — об отрицательном. Для контроля в этом методе используют заведомо Rh-отрицательные и Rh-положительные эритроциты. | | экспресс-метод | Реакцию проводят в пробирках без подогрева. Для этого необходима специальная, универсальная для всех групп крови системы АВО сыворотка, приготовленная особым способом на полиглюкине.
В пробирку помещают 1 каплю сыворотки, добавляют 1 каплю исследуемых эритроцитов и после 3-минутного покачивания заливают 3—5 мл изотонического раствора хлорида натрия, трижды переворачивают пробирку и определяют результат в отраженном свете. Наличие агглютинации свидетельствует о наличии Rh-антигена. | | Желатиновый экспресс-метод | Широко применяется также желатиновый экспресс-метод, основанный на добавлении к крови 1 капли 10 % раствора желатина и 10-минутной инкубации пробирок при +37 °С и добавлении теплого изотонического раствора хлорида натрия; производят перемешивание содержимого пробирки. Желатин способствует исчезновению неспецифической агглютинации. На этом же принципе основан метод определения Rh с папаином. | Любой из этих методов может быть использован в экстренных случаях. Независимо от результатов проведенных исследований и имеющихся данных об идентичности групп крови донора и реципиента перед переливанием крови необходимо провести пробы на индивидуальную совместимость.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 569 | Нарушение авторских прав
|
