IX. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА
Бактериологическое исследование у лиц с заболеваниями органов дыхания начинается, как правило, в учреждениях общей лечебной сети в клинико-диагностических лабораториях. При обнаружении бактериоскопическим методом кислотоустойчивых микобактерии (более 3 в 100 полях зрения) больной направляется в противотуберкулезный диспансер. В бактериологических лабораториях противотуберкулезных диспансеров проводится комплекс микробиологических методов исследования. Помимо бактериоскопии мазка выполняются все этапы культу рал ьного исследования с целью получения роста возбудителя и его идентификации с последующим определением чувствительности выделенной культуры к противотуберкулезным препаратам. Микробиологической диагностике может подлежать любой биологический и патологический материал, выделенный от больного: мокрота, промывные воды желудка и бронхов, смыв из бронхиального дерева, материал, полученный при бронхо-альвеолярном лаваже, моча, капиллярная и венозная кровь, плевральный и перикардиальный выпот, спинномозговая жидкость; отделяемое из свищей, биоптаты, приготовленные из операционного материала или полученные при щеточной и щипцевой биопсии. У больных, выделяющих мокроту, собирают ее утреннюю порцию. Правильно собранная мокрота имеет слизистый или слизисто-гнойный характер. Оптимальный объем исследуемой порции мокроты составляет 3-5 мл. Необходимо иметь в виду, что в момент откашливания больным мокроты создается очень высокий риск воздушно-капельного распространения инфекции. В связи с этим необходимо, чтобы сбор мокроты проводили в специальном, хорошо вентилируемом помещении, оснащенном бактерицидными, ультрафиолетовыми лампами и средствами дезинфекции. Сбор мокроты проводится под контролем медицинского работника.
Правила сбора мокроты:
- перед сбором мокроты больной должен хорошо прополоскать
рот водой, чтобы механически удалить основную часть посторонней микробной флоры и остатки пищи, загрязняющие мок роту;
- прикрыть рот и нос куском ткани или носовым платком и откашлять мокроту из глубины грудной клетки. Если больной не может откашлять спонтанно мокроту, необходимо сделать несколько глубоких вдохов и затем задержать дыхание. Несколько аналогичных повторов чаще всего способствуют возникновению кашля;
- поднести контейнер к нижней губе и осторожно высвободить мокроту из полости рта в контейнер, избегая брызг и расплескивания. Затем плотно закрыть контейнер крышкой;
- поместить контейнер в штатив.
При исследовании мокроты желательно собрать не менее 3 проб утренней мокроты в течение 3 дней, что повышает результаты исследования. Если больной не выделяет мокроту, то накануне или рано утром ему следует дать отхаркивающие и муколитические средства или применить раздражающие ингаляции.
Собранный материал необходимо как можно быстрее отправить в лабораторию. При невозможности немедленной доставки материал сохраняется в холодильнике при температуре +4°С не более 48 часов.
Промывные воды бронхов. Сбор материала производится врачом-отоларингологом. Больному несколько раз во время вдоха вводят шприцем в трахею 5-7 мл подогретого стерильного изстоническо-го раствора, который вызывает кашлевой рефлекс. При этом откашливается секрет из глубоких отделов бронхиального дерева. Промывные воды бронхов собирают в стерильный флакон и направляют в бактериологическую лабораторию.
У детей младшего возраста, которые плохо откашливают мокроту и часто заглатывают ее, могут быть исследованы промывные воды желудка. Промывные воды желудка следует брать натощак, перед забором материала больному дают выпить 100,0-150,0 раствора питьевой соды. После этого вводят желудочный зонд и собирают содержимое желудка в стерильный флакон.
Исследование мочи. Моча (средняя утренняя порция) собирается в стерильную посуду после туалета половых органов. Анализ мочи на возбудитель туберкулеза должен проводиться трижды,
Бактсриоскопические методы исследования патологического материала. Сущность метода заключается в способности микобактерий, окрашенных карболовым фуксином, удерживать краситель после длительного обесцвечивания в соляно-кислом спирте.
Методика окраски мазка методом Циля-Нельсена:
• готовят тонкий мазок на предметном стекле, который высушивают при комнатной температуре и фиксируют над пламенем горелки с использованием бесцветного или голубого пламени, располагая стекло мазком вверх;
• на фиксированный препарат накладывают полоску фильтровальной бумаги размером немного меньше предметного стекла, но так, чтобы она закрыла мазок полностью. Фильтровальную бумагу используют для того, чтобы краска не разливалась по стеклу;
• наливают на бумагу приблизительно 5 капель раствора карболового фуксина (фенола по Цилю-Нельсену) и нагревают препарат над пламенем горелки до появления паров, не допуская закипания краски и подсыхания бумага;
• подогретый мазок оставляют на 5 минут;
• после удаления фильтровальной бумаги при помощи пинцета препарат промывают проточной водой или водой из резервуара;
• мазок обесцвечивают в 25% растворе серной кислоты (Н2304) или в 3% соляно-кислом спирте, наливая на него несколько капель до полного обесцвечивания. Продолжительность процедуры обесцвечивания - 2-3 минут;
• повторно мазок промывают проточной водой;
• мазок докрашивают 0,3 % раствором метиленового синего стечение 60 секунд;
• мазок промывают проточной водой;
• мазок высушивают при комнатной температуре в вертикальном положении.
В результате выполненной процедуры кислотоустойчивые микобактерий окрашиваются в малиново-красный цвет, а другие микроорганизмы и клеточные элементы - в голубой. Препарат микроскопируют с масляной иммерсией в световом бинокулярном микроскопе, просматривают не менее 100 полей зрения. Чувствительность микроскопии при окраске мазков по методу Циля-Нельсена составляет 50.000-100.000 бактериальных клеток в 1 мл материала. У больных с остро прогрессирующими формами туберкулеза кислотоустойчивые бактерии можно выявить при их содержании свыше 5.000 микробных тел в 1 мл мокроты (табл. 4).
Таблица 4
Учет результатов микроскопического исследований
патологического материала при окраске
по методу Циля-Нельсена
Количество
кислотоустойчивых микобактерий
| Число
иммерсионных
полей зрения
| Ответ
|
качественный
| количественный
| Отсутствуют 300
| отрицательны и 0
| 1-3
|
| сомнительный
| рекомендовано
повторить исследование
| 1-9
|
| положительный
| единичные в
препарате,
указать число
МВТ
| 10-99
| 100 положительный единичные в
поле зрения (1+)
| 1-10
| 1 положительный умеренное
количество (2+)
| Более 10
|
| положительный
| значительное количество (3+)
| Микроскопическое обнаружение кислотоустойчивых микобактерий (КУМ) не позволяет дифференцировать m.tuberculosis от нетуберкулезных микобактерий - возбудителей микобактериозов, а следовательно, не позволяет достоверно определить этиологию заболевания.
Дата добавления: 2015-08-14 | Просмотры: 807 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
|