АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Техника проведения аллергологических проб

Капельная проба.

Для постановки кожных капельных проб применяются водные растворы веществ. Обычно употребляются невысокие концентрации аллергенов, например, 0,25% раствор новокаина, 50000 пенициллина. Каплю раствора аллергена наносят на неповрежденную кожу (волярную поверхность) предплечья, живота. Параллельно ставят контрольную капельную пробу с растворителем (физиологическим раствором или дистиллированной водой).

Результаты капельной пробы регистрируются через 20 минут и спустя сутки с момента нанесения испытуемого раствора лекарственного вещества. Если в месте нанесения лекарства есть гиперемия, отек, то реакция положительная, данный препарат назначать нельзя.

Аппликационная кожная проба.

Аппликационные кожные пробы делают на волярной поверхности предплечья, на животе, спине. При этом на кожу накладывают марлю размером 2х2 см, смоченную раствором исследуемого лекарственного вещества. Сверху марли накладывают компрессную бумагу или целлофан, затем наклеивают кусок лейкопластыря 4х4 см. Аналогичным образом делают и с контрольным растворителем (физ.раствором).

Результаты оцениваются через 24-72 часа следующим образом: гиперемия (+); гиперемия, отечность, образование папул (++); яркая эритема, отечность, папулы, везикулы (+++); образование крупных пузырей и некроза (++++). Лейкопластырь в местах непосредственного контакта с кожей, как правило, вызывает раздражение кожи (непосредственная реакция-гиперемия, отек), поэтому оценивать нужно только участок кожи, непосредственно соприкасающийся с марлей, смоченной раствором лекарственного препарата.

В случае резкого нарастания аллергической реакции (появление зуда, чувства жжения и т.д.) пробу следует быстро снять и обмыть кожные покровы, и данное лекарство не назначать.

Скарификационная кожная проба.

Перед постановкой этой пробы - кожу (спины, живота или внутренней поверхности предплечья) следует обработать спиртом. Затем на расстоянии 5 см друг от друга наносят каплю 0,01% раствора гистамина (положительный контроль), каплю испытуемого лекарственного аллергена и каплю разводящей жидкости - физиологического раствора (отрицательный контроль). Стерильными иглами или скарификаторами наносят две поверхностные скарификации (не кровоточащие) в длину до 5-10 мм, на расстоянии 3 мм друг от друга. Реакцию оценивают через 20 минут, промокая капли аллергена отдельными ватными тампонами. Надо смотреть и через 24 часа (могут быть замедленные реакции).

Если на месте скарификации развивается гиперемия, а при натягивании кожи отек (побеление) в месте царапин, реакция слабоположительная (+).

Если волдырь с гиперемией в месте царапин виден на глаз, а при натягивании отек увеличивается, то реакция положительная (++).

Волдырь диаметром 10 мм с гиперемией и ложноножками свидетельствует о резко положительной реакции (+++).

Волдырь размером более 10 мм в диаметре с псевдоподиями и гиперемией показывает о реакции положительной в очень резкой степени (++++).

Провокационная подъязычная проба.

Перед проведением пробы осмотреть подъязычную область. Больному под язык дается 1/4 разовой терапевтической дозы испытуемого лекарственного препарата. При положительной пробе через 10-20 минут у больного появляется отек уздечки языка, отек губ, кожный зуд; единичные или распространенные уртикарные высыпания. При этом больной должен немедленно удалить оставшуюся часть препарата, прополоскать рот, не глотая жидкости, и принять антигистаминные.

Провокационная проба.

Пероральная:

Больному дается 1/4 разовой терапевтической дозы испытуемого лекарственного препарата. При положительной пробе в течение ближайших 2 часов могут появиться удушье, единичные волдырные элементы, повышение температуры. При этом больному дается солевое слабительное и назначаются антигистаминные препараты.

Парентеральная:

Четверть разовой дозы вводится внутримышечно в область бедра, если препарат вводится внутримышечно; п/к - в область предплечья, если препарат вводится подкожно и оценивается через 20 минут. При отрицательном результате через два часа вводится разовая доза. При проведении пробы с препаратом для внутривенного введения готовится раствор для внутривенного капельного введения и вводится медленно 10-20 капель в минуту в течении 2-5 минут. При отсутствии общих клинических симптомов и изменений гемодинамики введение лекарственного вещества продолжается.

Провокационные пробы проводятся врачом под контролем гемодинамики.

Тест торможения естественной эмиграции лейкоцитов in vivo для специфической диагностики лекарственной аллергии (ТТЭЛ)

Для ТТЭЛ необходимы:
Оборудование: (на одно исследование)

1. 4 химических стаканчика емкостью 50 мл.

2. 5 пробирок емкостью 20 мл.

3. Штатив для пробирок (1).

4. 2 пипетки (1,0 и 10,0 мл.).

5. Микропипетки (2).

6. Счетная камера Горяева (1).

7. Часовое стекло (1).

8. Микроскоп бинокулярный (об.20, ок.7)

Реактивы:

1. Физиологический раствор рН 7,3-7,4 (рН раствора устанавливается добавлением 0,1 М NаОН при помощи потенциометра ПП-0,1).

2. 0,01% раствор красителя генцианового фиолетового в 3% уксусной кислоте.

Медикаменты:

Для исследования используются водорастворимые формы медикаментов в следующих концентрациях:

1. Пенициллин - 1 мк/мл.

2. Цефалоспорины (цефазолин, кофзол, цефамизин)-1 мкг/мл.

3. Аминогликозиды (стрептомицин, канамицин, гентамицин)-10 мкг/мл.

4. Макролиды (эритромицин)-10 мкг/мл.

5. Хлорамфеникол (левомицетин) -10 мкг/мл.

6. Тетрациклины -10мкг/мл.

7. Сульфаниламидные препараты-100 мкг/мл.

8. Производные пиразолона и ацетилсалициловой кислоты-100 мкг/мл.

9. Местные анестетики (новокаин, лидокаин, тримекаин)-100 мкг/мл.

10. Антибиотики других химических групп - 10 мкг/мл.

Если у больного в анамнезе отмечались анафилактические реакции на введение медикаментов, то независимо от названия лекарственного препарата исследования начинают с концентрации препарата 1 мкг/мл. В случае отрицательного результата тест повторяют с этим же медикаментом в дозе 10 мкг/мл, а если необходимо - то с дозой 100 мкг/мл.

В один день можно проводить только одно исследование с одним препаратом и с одной его концентрацией. Во время проведения теста запрещается принимать пищу, пить, курить, принимать лекарственные препараты. Тест проводится в процедурном кабинете.

До и после постановки ТТЭЛ in vivo врач тщательно осматривает больного, измеряет АД, ЧСС, частоту дыхания.

Обследование рассчитано на 1,5 часа и состоит из двух этапов.

I-й этап:

Подготовка материала к исследованию:

1. Через час после еды больной тщательно прополаскивает полость рта кипяченой водой для механической очистки ее в течении 2-х минут.

2. Спустя 30 минут после первого полоскания следует прополоскать передний отрезок полости рта 10 мл физиологического раствора (рН 7,3-7,4) в течение 2-х минут.

3. Жидкость из полости рта (промывные воды) собирают в стаканчик №1, как исходную порцию (контроль).

4. Через 15 минут производится полоскание полости рта в течение 2-х минут физиологическим раствором с разведенной в нем исходной концентрацией испытуемого медикамента. Эта порция промывной жидкости собирается в стаканчик №2 и в дальнейшей работе не используется.

5. Еще через 15 минут вновь ополаскивают передний отрезок полости рта в течение 2-х минут 10 мл физиологического раствора (рН 7,3-7,4) и промывную жидкость собирают в стаканчик №3.

6. После этого через 15 минут передний отрезок полости рта ополаскивают в течение 2-х минут 10 мл физиологического раствора (рН 7,3-7,4) и собирают промывную жидкость в стаканчик №4.

II-й этап:

Окраска и подсчет лейкоцитов в собранном материале. Приготовление и просмотр окрашенных мазков.

1. Промывную жидкость из полости рта в стаканчике №1 (контрольная порция) после получения тотчас тщательно перемешивают микропипеткой и в количестве 0,2 мл помещают на часовое стекло.

2. Туда же добавляют 0,04 мл раствора красителя генцианового фиолетового.

3. Через 5 минут исследуемую смесь помещают под притертое стекло камеры Горяева.

4. Подсчет лейкоцитов проводиться в 100 больших квадратах камеры Горяева и рассчитывает количество лейкоцитов в 1 кубическом мм.

Таким же образом подсчитывают количество лейкоцитов в стаканчиках № 3 и 4 (опытные порции)

Индекс эмиграции лейкоцитов в полости рта рассчитывают по формуле:

Нк

где Нк-количество лейкоцитов (нейтрофилов) в первой, исходной порции, Но-количество лейкоцитов (нейтрофилов) в опытных стаканчиках №3 и 4.

Тест оценивается как положительный при снижении числа клеток по индексу эмиграции более, чем на 30%.

Приложение №5.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 3064 | Нарушение авторских прав