Тесты, имеющие историческое значение
Тест Шелли / Шварца — дегрануляция базофилов/тучных клеток в присутствии специфического аллергена. Тест широко использовался при лабораторной диагностике аллергических заболеваний ГНТ I типа.
Непрямой базофильный тест (тест Шелли). Этот тест основан на изучении морфологических изменений базофилов в результате взаимодействия сыворотки больного и специфического аллергена. Краситель нейтральный красный избирательно окрашивает гранулы базофилов в кирпично-красный цвет, что позволяет отличать их от других клеток. Реакцию наблюдают под микроскопом с иммерсионной системой. Неизмененные базофилы имеют округлую форму; гранулы, окрашенные краской, располагаются внутри клетки. Положительная реакция проявляется в деформации клеток, образовании псевдоподий, усиленном движении гранул и в редких случаях – выходом гранул из клетки с разрывом ее. В каждом препарате насчитывают 40 базофилов, вычисляют процент морфологически измененных клеток и в опыте, и в контроле.
Условно выделяют 3 степени реакции: слабую (процент измененных базофилов в опыте превышает таковой в контроле на 10 %), умеренную (на 15 %), резко положительную (на 20 % и более). Во всех случаях имеются в виду результаты контроля с наивысшей неспецифической реакцией базофилов.
Прямой базофильный тест (тест Шелли). Данный тест основан на изучении морфологических изменений базофилов периферической крови пациента с аллергическим заболеванием при взаимодействии со специфическим аллергеном. Оценка реакции проводится аналогично оценке при непрямом базофильном тесте.
Реакция повреждения гранулоцитов (РПГ), показатель повреждения нейтрофилов (ППН), реакция выброса из лейкоцитов калия, ферментов и т. д. Существует большое количество методик в рамках указанного подхода. Например, выделенные лейкоциты инкубируются с раствором аллергена в течение определенного времени, после чего повреждение нейтрофилов регистрируется:
– морфологически: по изменению морфологии, путем окрашивания трипановым синим, бромистым этидием и т. д. (окрашиваются поврежденные/мертвые клетки);
– фотометрически: прирост концентрации ионов калия определяют на пламенном фотометре, выброс миелопероксидазы — по ферментации субстрата-хромогена и изменению цвета раствора — на планшетном фотометре.
Реакция высвобождения гистамина из базофилов периферической крови человека основана на учете высвобождения гистамина после обработки базофильных клеток специфическими аллергенами. Стимуляторами высвобождения гистамина из клеток являются аллергены, анти-IgE, С5а. Ряд цитокинов — ИЛ-3, ИЛ-5, КСФ-ГМ — усиливают высвобождение гистамина базофилами. Тест использовался с целью выявления степени сенсибилизации организма in vitro при крапивнице, атопическом дерматите и в экспериментальных исследованиях.
Тесты, не рекомендующиеся для применения и/или интерпре-тации:
1. Определение IgG, в т. ч. IgG4 (за исключением случаев, когда это имеет значение).
2. Кинезиология (метрия) — контакт (демонстрация) больного с аллергеном и одновременное измерение относительной мышечной силы. В случае обнаружения причинного аллергена сила уменьшается. При обнаружении специфического антидота — восстанавливается.
3. VEGA (электродермометрия, тест Фолля) — измерение сопротивления кожи (тканей) между акупунктурными точками при одновременном контакте (демонстрации) с аллергеном. Существуют коммерческие аппараты и тест- системы.
4. Аурикулокардиальный рефлекс — измерение параметров кровенаполнения/пульса и т. д. в момент контакта с аллергеном.
5. Тест провокации-нейтрализации: постановка кожных или других проб с постепенным увеличением концентрации аллергена до достижения выраженной реакции. Таким образом находят разрешающую концентрацию. Далее ставят пробы, постепенно уменьшая концентрацию аллергена, до исчезновения реакции. Эта концентрация может применяться для специфической десенсибилизации.
6. Анализ реакции крови: каплю крови смешивают с растворами аллергенов/пищевых продуктов и т. д. Через некоторое время микроскопически изучают изменения в опытной капле по сравнению с контрольной.
7. Иридодиагностика аллергии.
8. Диагностика аллергии по нарушению циркуляции различных мистических видов энергии человеческого тела или духа.
* Часто в реакции ГНТ выделяют раннюю и позднюю фазы (до 6 и до 24 ч соответственно).
* В настоящее время аппликационные пробы в основном применяют для диагностики контактной ГЗТ (T.R.U.E.-тест, пэтч-тест и др.).
Дата добавления: 2015-11-26 | Просмотры: 577 | Нарушение авторских прав
|