АНТИ-А, АНТИ-В, АНТИ-АВ
Реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВ0 в прямых реакциях гемагглютинации.
Моноклональные анти-А, анти-В, анти-АВ антитела являются продуктом жизнедеятельности специфических мышиных гибридом и принадлежат к иммуноглобулинам класса М.
Определение производится в крови с консервантом, без консерванта, венозной или капиллярной.
На планшет (пластинку) наносят по одной большой капле (0,1 мл) реагенты анти-А, анти-В, анти-АВ под соответствующими надписями.
Рядом с каплями реагентов наносят по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл), затем реагент и кровь смешивают и наблюдают за ходом реакции при легком покачивании пластины или планшета в течение 5 минут. Агглютинация эритроцитов обычно наступает в первые 3-5 секунд, но наблюдение следует вести 5 минут ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.
Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро склеивающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
При положительном результате реакции агглютинации со всеми реагентами необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого смешивают на плоскости одну каплю физиологического раствора хлорида натрия с одной каплей исследуемых эритроцитов. Заключение о принадлежности исследуемой крови к группе АВ(IV) делают только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.
Учет результатов реакции агглютинации представлен в таблице 3.
Таблица 3
Интерпретация результатов реакции агглютинации
эритроцитов моноклональными антителами
Результат* реакции с реагентом
| Группа крови АВ0
| Анти-А
| Анти-В
| Анти-АВ
| -
| -
| -
| 0(I)
| +
| -
| +
| A(II)
| -
| +
| +
| B(III)
| +
| +
| +
| AB(IV)
| * Знаком плюс обозначено наличие агглютинации, знаком минус – отсутствие
Примечание:
В большинстве случаев при определении групп крови моноклональными реагентами достаточно вести учет реакции по наличию или отсутствию агглютинации с двумя реагентами: анти-А и анти-В.
Дополнительное введение в реакцию реагента анти-АВ необходимо в диагностических лабораториях при возникновении затруднений при определении групп крови.
При получении сомнительного результата определение группы крови АВ0 проводится с использованием изогемагглютинирующих сывороток от доноров крови или моноклональных антител другого производителя.
Дополнение 2
Дата добавления: 2015-11-28 | Просмотры: 787 | Нарушение авторских прав
|