Технология использования способа
Для проведения исследования используют консервированную кровь или кровь, взятую без консерванта. Приготовить взвесь исследуемых эритроцитов в растворе для разведения 1, если используются ID-карты, содержащие антитела сыворотки крови человека, для чего:
выдержать раствор для разведения 1 до достижения комнатной температуры (+18° – +25°С);
в промаркированной пробирке приготовить 5%-ую взвесь типируемых эритроцитов в растворе для разведения 1, поместив в пробирку 0,5 мл раствора для разведения 1 и 0,05 мл цельной крови или 0,025 мл эритроцитарной массы;
выдержать пробирку при комнатной температуре (+18°–+25°С) в течение 10 минут.
Приготовить взвесь исследуемых эритроцитов в растворе для разведения 2, если используются ID-карты, содержащие моноклональные антитела, для чего:
выдержать раствор для разведения 2 до достижения комнатной температуры (+18° – +25°С);
в промаркированной пробирке приготовить 5%-ую взвесь типируемых эритроцитов в растворе для разведения 2, поместив в пробирку 0,5 мл раствора для разведения 2 и 0,05 мл цельной крови или 0,025 мл эритроцитарной массы.
С промаркированной ID-карты снять защитную фольгу и внести в каждую пробирку по 0,01 мл исследуемых эритроцитов, приготовленных в растворе для разведения 1, или по 0,0125 мл (12,5 мкл) исследуемых эритроцитов, приготовленных в растворе для разведения 2.
Центрифугировать ID-карты в центрифуге в течение 10 минут.
Оценить результаты исследования (рисунок 1, таблица 4).

Рисунок 1. Оценка результатов реакции агглютинации
в гелевом тесте
Характер агглютинации при выявлении антигенов в гелевом тесте зависит от количества антигенных детерминант, присутствующих на одном эритроците. Образцы эритроцитов с большим количеством антигенных детерминант имеют характер агглютинации 4+, характер агглютинации эритроцитов со слабыми вариантами антигенов соответствует диапазону от 3+ до +.
Таблица 4
Результаты исследования антигенов группы крови АВ0 и
резус-принадлежности в ID-карте АВ0/Rh
Выявляемые антигены
| Контроль
| Заключение об АВ0
и резус-принадлежности исследуемого образца
крови
| А
| В
| АВ
| D
| CDE
| +
| +
| +
| +
| +
| -
| AB Rh+
| +
| +
| +
| -
| -
| -
| AB Rh-
| +
| -
| +
| +
| +
| -
| A Rh+
| +
| -
| +
| -
| -
| -
| A Rh-
| -
| +
| +
| +
| +
| -
| B Rh+
| -
| +
| +
| -
| -
| -
| B Rh-
| -
| -
| -
| +
| +
| -
| 0 Rh+
| -
| -
| -
| -
| -
| -
| 0 Rh-
|
Специфичность исследования подтверждается по отрицательному результату в пробирке с контролем ID-карты. При наличии положительных и слабоположительных реакций в контроле необходимо повторить исследование с отмытыми эритроцитами и провести дополнительное исследование по выявлению холодовых и тепловых аутоантител. В случае выявления аутоантител типирование антигенов эритроцитов проводят после предварительной аутоадсорбции и элюции аутоантител.
Подробная инструкция по применению прилагается к каждому набору идентификационных карт ID-ДиаМед фирмы «ДиаМед» (Швейцария) или других производителей.
Дополнение 3
Дата добавления: 2015-11-28 | Просмотры: 458 | Нарушение авторских прав
|