Унифицированный метод определения глобулинов
Принцип: соли в определённой концентрации избирательно осаждают глобулины. 
 Реактивы: насыщенный раствор сульфата аммония. 
 Ход определения: 
 1. В химическую пробирку вносят 0,5 мл ликвора и 0,5 мл реактива. 
 2. Содержимое пробирки хорошо перемешивают. 
 3. Контролем служит 1 мл дистиллированной воды. 
 4. Пробы смотрят на чёрном фоне. 
 Оценка полученных результатов: 
 Результат смотрят в течение 3-х минут, так как после 3-х минут помутнение может произойти в нормальном ликворе. 
 Оценка производится по 4-х крёстной системе: 
 - Слабая опалесценция (+) 
 - Заметная опалесценция (++) 
 - Умеренное помутнение (+++) 
 - Значительная мутность (++++) 
 Клиническое значение: Проба даёт относительное представление о содержании глобулинов в ликворе. 
 Количественное определение белка 
 Проба Бранберга-Робертса-Стольникова 
 Принцип: коагуляция белка кислотой с образование кольца. 
 Реактивы: реактив Ларионовой 
 Ход определения: 
 Ликвор предварительно разводят (физиологическим раствором) в зависимости от результата пробы Панди, кроме отрицательной пробы. 
 1. В агглютинационную пробирку наливают 1 мл реактива Ларионовой. 
 2. Осторожно по стенки пробирки наслаивают ликвор. 
 Оценка полученного результата пробы: пробирку с ликвором смотрят на чёрном фоне. 
 Появление нитевидного кольца на 3 минуте соответствует 0,033 г/л белка. 
 Полученный результат умножают на степень разведения. При положительной пробе Панди результат умножают при (+) на 10, при (++) на 20, при (+++) на 30, при (++++) на 40. 
 Определение белка с сульфосалициловой кислотой и сульфатом натрия 
 Принцип: интенсивность помутнения при коагуляции белка кислотой пропорциональна его концентрации. 
 Реактивы: 
 1. 6% раствор сульфосалициловой кислоты. 
 2. 14% раствор безводного сульфата натрия. 
 3. Рабочий раствор (свежеприготовленная смесь равных объёмов реактивов 1 и 2). 
 4. Стандартный раствор альбумина. 
 Оборудование: ФЭК. 
 Ход определения: 
 1. В пробирку наливают 5 мл свежеприготовленного рабочего раствора. 
 2. Добавляют 0,5 мл ликвора. Тщательно перемешивают и оставляют на 10 минут. 
 3. Нефелометрируют на ФЭКе в кювете с рабочей шириной 1 см против контроля (0,9% раствора хлорида натрия (физ. раствора)). Длина волны 410-480 нм (сине-фиолетовый светофильтр). 
 4. Расчёт производят по калибровочному графику. 
 Примечание: 
 1. Если муть начинает оседать перед измерением на ФЭКе, то пробирку следует тщательно встряхнуть. 
 2. Перед опытом целесообразно поставить пробу Панди, и если результат реакции оценивают в «+++» или «++++», то перед количественным исследованием ликвор надо развести изотоническим раствором хлорида натрия и при расчёте учесть степень разведения. 
 Норма: 
 В ликворе из желудочков мозга: 0,12 – 0,2 г/л. 
 В ликворе из цистерн: 0,1 – 0,22 г/л. 
 В ликворе из поясничной области: 0,22 – 0,33 г/л. 
 Клиническое значение: повышенное содержание белка в ликворе отмечается при нарушение гемодинамики, воспалительных процессах, органических поражениях ЦНС и оболочек мозга. 
 Клиническое значение определения белка в ликворе: 
 При исследовании ликвора очень часто определяют содержания белка. В норме ликвор беден белками. Увеличение содержания общего белка в ликворе служит показателем патологического процесса, но и нормальные значения не исключают этого. 
 Считают, что в раннем детском возрасте концентрация белка в ликворе более высокая вследствие незрелости ГЭБ (гемато-энцефалистического барьера). 
 Увеличение концентрации белка в ликворе – гиперпротеинрахия – отмечается при гнойных менингитах, полиомиелите, кровоизлияниях в субарахноидальное пространство, арахноидитах, абсцессах мозга. 
 Уменьшение количества общего белка в ликворе – гипопротеинрахия – редкое явление. Оно наблюдается при повышенном внутричерепном давлении (при гидроцефалии, пневмоэнцефалографии). 
 Исследование состава белков и их коллоидной устойчивости пользуются для дифференциации воспалительных и дегенеративных процессов в головном и спинном мозге. Это исследование имеет значение, главным образом, для диагностики сифилиса ЦНС. 
   
 Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 874 | Нарушение авторских прав 
 
 
 
  
 |