Унифицированный метод определения глобулинов
Принцип: соли в определённой концентрации избирательно осаждают глобулины.
Реактивы: насыщенный раствор сульфата аммония.
Ход определения:
1. В химическую пробирку вносят 0,5 мл ликвора и 0,5 мл реактива.
2. Содержимое пробирки хорошо перемешивают.
3. Контролем служит 1 мл дистиллированной воды.
4. Пробы смотрят на чёрном фоне.
Оценка полученных результатов:
Результат смотрят в течение 3-х минут, так как после 3-х минут помутнение может произойти в нормальном ликворе.
Оценка производится по 4-х крёстной системе:
- Слабая опалесценция (+)
- Заметная опалесценция (++)
- Умеренное помутнение (+++)
- Значительная мутность (++++)
Клиническое значение: Проба даёт относительное представление о содержании глобулинов в ликворе.
Количественное определение белка
Проба Бранберга-Робертса-Стольникова
Принцип: коагуляция белка кислотой с образование кольца.
Реактивы: реактив Ларионовой
Ход определения:
Ликвор предварительно разводят (физиологическим раствором) в зависимости от результата пробы Панди, кроме отрицательной пробы.
1. В агглютинационную пробирку наливают 1 мл реактива Ларионовой.
2. Осторожно по стенки пробирки наслаивают ликвор.
Оценка полученного результата пробы: пробирку с ликвором смотрят на чёрном фоне.
Появление нитевидного кольца на 3 минуте соответствует 0,033 г/л белка.
Полученный результат умножают на степень разведения. При положительной пробе Панди результат умножают при (+) на 10, при (++) на 20, при (+++) на 30, при (++++) на 40.
Определение белка с сульфосалициловой кислотой и сульфатом натрия
Принцип: интенсивность помутнения при коагуляции белка кислотой пропорциональна его концентрации.
Реактивы:
1. 6% раствор сульфосалициловой кислоты.
2. 14% раствор безводного сульфата натрия.
3. Рабочий раствор (свежеприготовленная смесь равных объёмов реактивов 1 и 2).
4. Стандартный раствор альбумина.
Оборудование: ФЭК.
Ход определения:
1. В пробирку наливают 5 мл свежеприготовленного рабочего раствора.
2. Добавляют 0,5 мл ликвора. Тщательно перемешивают и оставляют на 10 минут.
3. Нефелометрируют на ФЭКе в кювете с рабочей шириной 1 см против контроля (0,9% раствора хлорида натрия (физ. раствора)). Длина волны 410-480 нм (сине-фиолетовый светофильтр).
4. Расчёт производят по калибровочному графику.
Примечание:
1. Если муть начинает оседать перед измерением на ФЭКе, то пробирку следует тщательно встряхнуть.
2. Перед опытом целесообразно поставить пробу Панди, и если результат реакции оценивают в «+++» или «++++», то перед количественным исследованием ликвор надо развести изотоническим раствором хлорида натрия и при расчёте учесть степень разведения.
Норма:
В ликворе из желудочков мозга: 0,12 – 0,2 г/л.
В ликворе из цистерн: 0,1 – 0,22 г/л.
В ликворе из поясничной области: 0,22 – 0,33 г/л.
Клиническое значение: повышенное содержание белка в ликворе отмечается при нарушение гемодинамики, воспалительных процессах, органических поражениях ЦНС и оболочек мозга.
Клиническое значение определения белка в ликворе:
При исследовании ликвора очень часто определяют содержания белка. В норме ликвор беден белками. Увеличение содержания общего белка в ликворе служит показателем патологического процесса, но и нормальные значения не исключают этого.
Считают, что в раннем детском возрасте концентрация белка в ликворе более высокая вследствие незрелости ГЭБ (гемато-энцефалистического барьера).
Увеличение концентрации белка в ликворе – гиперпротеинрахия – отмечается при гнойных менингитах, полиомиелите, кровоизлияниях в субарахноидальное пространство, арахноидитах, абсцессах мозга.
Уменьшение количества общего белка в ликворе – гипопротеинрахия – редкое явление. Оно наблюдается при повышенном внутричерепном давлении (при гидроцефалии, пневмоэнцефалографии).
Исследование состава белков и их коллоидной устойчивости пользуются для дифференциации воспалительных и дегенеративных процессов в головном и спинном мозге. Это исследование имеет значение, главным образом, для диагностики сифилиса ЦНС.
Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 815 | Нарушение авторских прав
|