АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Работа 6. Прижизненное окрашивание клеток нейтральным красным

Прочитайте:
  1. A) отрыв одной или группы опухолевых клеток от первичного очага опухоли
  2. I. Индивидуальная работа
  3. I. Культуры клеток
  4. I. Медицинские осмотры работников, занятых на вредных работах и на работах с вредными и опасными производственными факторами
  5. I. Поверхностные антигены клеток крови
  6. Ig каких изотипов присутствуют на поверхности зрелых наивных B-клеток?
  7. II. Индивидуальная работа
  8. II. Индивидуальная работа.
  9. II. Общие требования к курсовым работам
  10. II. Самостоятельная работа

 

Материалы и оборудование: 1) луковица обыкновенного лука, ли­стья разных растений; 2) 0,02%-ный раствор нейтрального красного в капельнице; 3) 1 М раствор КNO3 в капельнице; 4) 10%-ный раствор аммиака в капельнице с притертой пипеткой; 5) скальпель; 6) лезвие бритвы; 7) препаровальная игла; 8) микроскоп; 9) предметные и по­кровные стекла; 10) стеклянная палочка; 11) стаканчик с водой; 12) ку­сочки фильтровальной бумаги; 13) цветные карандаши.

 

Краткий теоретический материал. Подобно метиленовой синей краска нейтральный крас­ный способна проникать в живые клетки и накапливаться в них в больших количествах. При непродолжительном пребы­вании клеток в растворе нейтрального красного цитоплазма не отмирает, в чем можно убедиться, вызвав плазмолиз ок­рашенных клеток (плазмолизироваться могут только жи­вые клетки). Нейтральный красный – двухцветный индика­тор: в кислой среде (рН<6) он имеет малиновую окраску, в щелочной – желтую.

Для понимания результатов данной работы необходи­мо иметь в виду, что в растворе с рН около 7 нейтральный красный находится в форме недиссоциированных молекул, хорошо растворимых в липидах мембран, тогда как в кис­лой среде это вещество диссоциирует на ионы, плохо раство­римые в липидах. Цитоплазма живой клетки имеет слабее сродство к красителю. Окрашивание цитоплазмы и ядра – признак повреждения клетки.

Ход работы. Приготовить 2-3 среза эпидермиса чешуи обыкновенного лука или листьев каких-либо других расте­ний и поместить их на предметное стекло в большую каплю раствора нейтрального красного, не накрывая покровным стеклом (при хорошем доступе воздуха прокрашивание про­исходит быстрее). Через 10-15 мин (не более) отсосать раствор краски фильтровальной бумагой, перенести срезы в каплю воды, накрыть покровным стеклом и рассмотреть в микроскоп. Заменить воду 1 М раствором КNO3 и ввести каплю 10%-ного аммиака, являющегося сильным ядом. Рас­смотреть препарат под микроскопом. Заменить воду 1 М раствором КNO3 и продол­жать наблюдения при большом увеличении. Зарисовать плазмолизированную клетку, отметив, какая часть окраше­на красителем (клеточная стенка, цитоплазма или вакуоль) и в какой цвет (раскрасить цветным карандашом).

Отсосать из-под покровного стекла раствор КNO3 и ввести каплю 10%-ного аммиака. Рассмотреть препарат под микро­скопом, обратив внимание на окраску цитоплазмы и ядра в погибших клетках. Зарисовать клетку.

Сделать выводы, ответив на следующие вопросы:

1. Велика ли проницаемость клеточных мембран для нейтрального красного?

2. В какой части живой клетки накапливается краситель и как это объяснить?

3. Какова реакция рН клеточного сока?

4. Как изменяется сродство цитоплазмы к нейтральному красному при ее повреждении?

 

 

Дата добавления: 2015-05-19 | Просмотры: 1771 | Нарушение авторских прав


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 |

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)