АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Работа 8. Определение сосущей силы клеток упрощенным методом (по Уршпрунгу)
Материалы и оборудование: 1) большой клубень картофеля; 2) 1 М раствор NаС1; 3) дистиллированная вода; 4) бюретки с воронками (2 шт.); 5) тарелка; 6) нож большой (кухонный); 7) скальпель; 8) пинцет; 9) крышки чашек Петри (7 шт.); 10) кусок стекла с прямыми углами (предметное стекло); 11) фильтровальная бумага; 12) карандаш по стеклу; 13) полоски миллиметровой бумаги 1×10 см; 14) термометр комнатный.
Краткий теоретический материал. Поступление воды в клетку определяется ее сосущей силой (S), которая зависит от степени насыщения клетки водой. В состоянии полного завядания (или начинающегося плазмолиза) тургорное давление отсутствует и сосущая сила клетки равна ее осмотическому давлению (Р = 0, S = π). При погружении клеток в воду тургорное давление достигает максимальной величины, а сосущая сила падает до нуля (Р = π, S = 0). Клетки наземных растений, как правило не бывают насыщены водой, у таких клеток Р<π, а S = π – Р.
Определение сосущей силы клеток упрощенным методом Уршпрунга осуществляется путем подбора равновесного раствора, в котором не происходит ни потери, ни поглощения воды клетками. Однако данный метод основан на измерении не концентрации растворов, а размеров кусков, вырезанных из исследуемых органов растений и погруженных в растворы известной концентрации: при погружении куска ткани в раствор, S которого больше S клеток, раствор отнимает воду от клеток и их размеры уменьшаются. Если S клеток больше S раствора, то клетки всасывают воду и увеличиваются в объеме. При равенстве S клеток и раствора размеры клеток не изменяются.
Упрощенный метод Уршпрунга пригоден только для крупных паренхиматозных органов со слабо развитыми механическими тканями (клубней, корнеплодов). Достоинство данного метода — простота и возможность непосредственно наблюдать за изменениями тургора в зависимости от степени насыщения клеток водой.
Ход работы. Приготовить по 20 мл растворов NaCl концентрации (моль/л) 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 и 5,0, смешивая в чашках соответствующие количества 1 М р-ра и воды. В одну чашку налить чистую воду. Вырезать из картофельного клубня большим ножом плоскопараллельную пластинку толщиной 3-4 мм, положить пластинку на тарелку; пользуясь предметным стеклом, вырезать из пластинки прямоугольник шириной 20-30 мм и длиной 40-70 мм (чем длиннее, тем лучше). Разрезать прямоугольник вдоль на 7 одинаковых полосок шириной 2-3 мм, измерить их длину с точностью до 0,5 мм и погрузить одну полоску в воду, а остальные — в приготовленные растворы, следя за тем, чтобы погружение было полным (даже небольшая часть полоски, оказавшаяся вне раствора, будет испарять воду, что приведет к грубому искажению результатов опыта). Готовить и измерять полоски следует быстро, не допуская подвядания материала. Тарелка, на которой разрезают клубень, стекло и скальпель должны быть сухими. Вытекающий из клубня при разрезании сок удаляют фильтровальной бумагой.
Через 20-30 мин пинцетом извлечь полоски из растворов, промокнуть фильтровальной бумагой и повторно измерить их длину. Записать результаты по форме:
Концентрация NaCl, моль/л
| 1,0
| 0,8
| 0,6
| 0,4
| 0,2
| 0,1
|
| Сосущая сила раствора, МПа
|
|
|
|
|
|
|
| Длина полоски, мм
| исходная
|
|
|
|
|
|
|
| после пребывания
в растворе
|
|
|
|
|
|
|
| Разность, мм
|
|
|
|
|
|
|
| Тургор
|
|
|
|
|
|
|
|
Во второй строке таблицы записать сосущую силу растворов, которая численно равна их осмотическому давлении. Вычислить по уравнению Вант-Гоффа: π=RTCi, где π – осмотическое давление, Мпа, R – универсальная газовая постоянна (0,00831кДж/град моль), T – абсолютная температура (273+toC), C – концентрация раствора, моль/л, i - изотонический коэффициент, показывающий отношение числа частиц (молекул и ионов) в растворе к исходному количеству молекул растворенного вещества.
Для неэлектролитов, например, для сахарозы, i=1. Для растворов электролитов i зависит от числа ионов, на которые распадается молекула, и степени диссоциации. Значения i для растворов NaCl следующие:
Концентрация NaCl, моль/л
| 1,0
| 0,8
| 0,7
| 0,6
| 0,5
| 0,4
| 0,3
| 0,2
| 0,1
| 0,01
| Изотонический коэффициент
| 1,62
| 1,64
| 1,66
| 1,68
| 1,70
| 1,73
| 1,75
| 1,78
| 1,83
| 1,93
|
Данные для разности длины полосок можно получить, вычтя из большей величины меньшую, причем увеличение длины обозначить знаком «+» а уменьшение — знаком «–». В последней строке отметит степень тургора ткани (сильный, средний, слабый) или его отсутствие; для определения этого показателя разложить полоски на тарелке так, чтобы они наполовину свисали с ее края.
Сделать выводы, объяснив причины изменения размеров полосок в растворах разной концентрации, и записать сосущую силу клеток перед погружением их в растворы.
Дата добавления: 2015-05-19 | Просмотры: 3033 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 |
|