АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Диагностические сыворотки

ð Различают следующие виды диагностических сывороток:

1. Антимикробные диагностические сыворотки (агглютинирующие). Содержат АТ против определенного возбудителя. Их получают путем гипериммунизации мелких животных (чаще кроликов) клетками различных возбудителей или их антигенами. Антигены вводят подкожно и внутривенно. После определенного цикла иммунизации у животных производят пробное кровопускание (2-3 мл) и определяют титр антител. Если титр антител достаточен, делают массивное кро­вопускание или тотальное обескровливание. После выдерживания крови в термостате и образования сгустка, сыворотку отделяют, добавляют 0,01 % раствор хинозола или других консервирующих веществ, титруют, разливают в ампулы и контролируют в контрольной лаборатории.

Различают неадсорбированные и адсорбированные диагностические сыворотки.

а) неадсорбированные антимикробные сыворотки (нативные). Применяются для постановки развернутой реакции агглютинации в пробирках с культурой неизвестного микроба. Обладают высоким титром (от 1:2500 до 1:25000). Недостатком этих сывороток является то, что они способны давать групповые реакции из-за наличия групповых антител.

б) адсорбированные антимикробные сыворотки. Отличаются строгой специфичностью т.к. из них методом адсорбции по Кастелани удаляют все антитела, кроме антител, указанных на этикетке. Например, для удаления из антимикробной агглютинирующей сыворотки групповых антител к ней добавляют микробные взвеси родственных бактерий, на которых эти антитела адсорбируются; после удаления иммунных комплексов в адсорбированной сыво­ротке сохраняются типоспецифические антитела. Адсорбированные сыворотки применяются для постановки реакции агглютинации на стекле с культурой неизвестного микроба. Данные сыворотки обладают низким титром (от 1:40 до 1:320) и не подлежат разведе­нию.

Важной характеристикой диагностической сыворотки является ее титр. Титр антимикробной сыворотки - это ее максимальное разведение, которое еще агглютинирует гомологичный микроб.

2. Антитоксические диагностические сыворотки. Содержат антитела против определенных бактериальных экзотоксинов. Их получают путем гипериммунизации кроликов сначала анатоксином, а затем соответствующим экзотоксином. Дозируются в антитоксических единицах (АЕ/мл), т.е. по способности нейтрализовать определенное число доз соответствующего экзотоксина.

3. Преципитирующие диагностические сыворотки. Содержат антитела-преципитины. С помощью реакции преципитации можно обнаружить ничтожные следы специфичного белка (1:100 000). Преципитирующие сыворотки изготавливают путем гипериммунизации животных микробными взвесями, фильтратами старых бульонных культур, аутолизатами и солевыми экстрактами микробов, а также полными антигенами бактерий. Иммунизация животных проводится циклами в течение нескольких месяцев. В первые две недели антиген вводят ежедневно малыми, а затем более массивными дозами 8-16 раз с интервалами 4-6 дней. Через 8-12 дней после последней инъекции антигена производят пробное кровопускание для определения титра сыворот­ки; если титр достаточно высок, делают массивное кровопускание. Титр преципитирующей сыворотки - наибольшее разведение антигена, дающее преципитацию при контакте с ней. Это объясняется тем, что антиген, участвующий в реакции, имеет ультрамикроскопическую величину и в единице объема его частиц содержится гораздо больше, чем антител в таком же объеме сыворотки. Преципитирующие сыворотки выпускаются с титром не ниже 1:100 000.

4. Люминесцирующие сыворотки. Получают путем присоединения флюорохрома к глобулиновой фракции иммунной сыворотки путем прочной химической связи. При этом маркированные антитела полностью сохраняют способность специфически связывать­ся с соответствующими антигенами.

Дата добавления: 2015-07-23 | Просмотры: 3393 | Нарушение авторских прав