Метод кольцепреципитации
Для постановки реакции необходимо иметь 6 узких пробирок. 1-я пробирка является опытной, остальные – контрольными. В 1-ю пробирку наливают неразведенную преципитирующую сыворотку. Пастеровской пипеткой медленно по стенке наслаивают антиген-содержащий материал в эквивалентном сыворотке количестве. Результат реакции учитывают через 5-10 минут, 1-2 часа или 20-24 часа. При положительной реакции на границе антигена и сыворотки образуется белое кольцо преципитации.
Для правильной постановки РП необходимо провести контроль сыворотки и антигена.
Контроль сыворотки. Во 2,3 и 4 пробирки наливают преципитирующую сыворотку. Во 2-ю пробирку наслаивают известный специфический антиген, в 3-ю -экстракт, не содержащий антиген, в 4-ю - изотонический раствор хлорида натрия. Во 2-й пробирке реакция должна быть положительной, а в 3-й и 4-й - отрицательной.
Контроль антигена. Производят наслоение исследуемого антигена на нормальную сыворотку того же вида животного, от которого получена иммунная сыворотка. Контролю подлежит также экстракт, не содержащий антигена. Его наслаивают на контрольную сыворотку. В этих двух пробирках (5-я и 6-я) преципитации быть не должно. Схема реакции приводится на рис. 8.
Реакцию кольцепреципитации применяют для диагностики инфекционных заболеваний (сибирская язва, чума, туляремия и др.).
ð Недостатки метода:
- нестойкость кольца преципитации;
- невозможность установить количество разных антигенов, участвующих в образовании преципитата.
Дата добавления: 2015-07-23 | Просмотры: 774 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
|