Функция ф. VIIIа заключается в том, что в качестве кофактора ф. IХа он активирует ф. X и многократно ускоряет процесс свертывания плазмы крови. При недостаточности ф. VIII возникает гемофилия А, которую лечат введением антигемофильных лекарственных средств: свежезамороженной плазмы, криопреципитата, концентрата ф. VIII. Определение активности ф. VIII необходимо для диагностики гемофилии, для анализа активности антигемофильных лекарственных средств и для наблюдения за результатами терапии.
Компания "РЕНАМ" разработала набор Фактор VIII-тест, набор реагентов для определения активности ф. VIII. В основу набора был положен одностадийный метод определения активности ф. VIII.
Набор Фактор VIII-тест предназначен для количественного исследования активности ф. VIII в плазме крови человека по стандартному одностадийному методу с целью диагностики гемофилии А и для контроля за достаточностью заместительной терапии при гемофилии А.
Принцип метода Измерение активности ф. VIII проводят в сильно разведенных образцах. При разведении активность всех факторов, необходимых для процесса свертывания, резко снижена. Для компенсации дефицита этих факторов в инкубационную среду вносят субстратную плазму, в которой практически отсутствует (менее 1%) активность ф. VIII, но сохранена активность всех других факторов свертывания. В такой системе продолжительность процесса свертывания зависит только от активности ф. VIII, которую определяют по калибровочному графику.
Анализ активности ф. VIIIв криопреципитате Учитывая, что активность ф. VIII в криопреципитате значительно выше, чем в плазме крови и в СЗП, а также то, что активность ф. VIII от разных производителей варьирует в достаточно широком диапазоне: от 70 до 200 МЕ в дозе (10-20 мл), исследователь должен сам подобрать необходимое разведение криопреципитата. Принято использовать 2 разведения: предварительное и последующее.
Аналитические характеристики Активность фактора VIII в контрольной плазме - 90-100 % или 0,9-1,0 МЕ/мл.
22
Допустимое отклонение активности фактора VIII в контрольной плазме от аттестованного значения - не более 10%.
Коэффициент вариации результатов определения - не более 10%.
Допустимый разброс результатов при определении активности фактора VIII в одной пробе плазмы крови разными наборами одной серии - не более 10%.
Чувствительность определения - 1,5 %.
Линейность определяемых значений активности фактора VIII в плазме крови человека в диапазоне разведений контрольной плазмы - от 2 до 100%.
Диапазон определяемых значений активности фактора VIII колеблется от 2 до 200 %.