АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Непрямая проба Кумбса как проба на совместимость переливаемой крови(в условиях лаборатории)

Оснащение:

пробирка № 1 высотой не менее 10 см с маркировкой, содержащей сведения о доноре (фамилия, инициалы, групповая и резус-принадлежность);

пробирка № 2 высотой 3-4 см с маркировкой, содержащей сведения о больном (фамилия, инициалы, групповая и резус-принадлежность);

лабораторная центрифуга;

термостат 37⁰С;

белые пластинки со смачиваемой поверхностью;

изотонический раствор хлорида натрия;

антиглобулиновая сыворотка;

пастеровские пипетки.

Техника проведения реакции

Через иглу устройства для переливания кровь, эритроцитную массу донора из бутылки, предназначенной для трансфузии, или из отрезка трубки контейнера набрать в количестве 1-2 мл в пробирку № 1.

Пробирку долить доверху изотоническим раствором хлорида натрия, содержимое перемешать, центрифугировать, отсосать отмывную жидкость. Такое отмывание повторить дважды, каждый раз удаляя отмывную жидкость.

Со дна пробирки № 1, содержащей отмытые эритроциты донора, очень тонкой пастеровской пипеткой набрать маленькую каплю (0,01 мл) эритроцитов и перенести ее в пробирку № 2.

В пробирку № 2 к эритроцитам донора добавить 3 капли сыворотки больного, пробирку встряхнуть для перемешивания эритроцитов с сывороткой, после чего поместить в термостат при 37⁰С на 45 минут. За это время изоиммунные антитела, если они имеются в сыворотке реципиента, фиксируются на эритроцитах донора.

После инкубации в пробирку № 2 добавить доверху изотонический раствор хлорида натрия, содержимое пробирки перемешать, центрифугировать и удалить отмывную жидкость. Такое отмывание эритроцитов повторить 3-4 раза.

К осадку отмытых эритроцитов добавить 3-4 капли изотонического раствора хлорида натрия для получения приблизительно 5% взвеси.

Одну каплю 5% взвеси эритроцитов перенести на белую пластинку, добавить по одной капле антиглобулиновой сыворотки.

Сыворотку перемешать с эритроцитами и наблюдать результат реакции при покачивании пластинки в течение 20-ти минут.

При несовместимости по резус-фактору агглютинация обычно наступает в течение первой минуты. Однако при низком титре резус-антител (или других антител) агглютинация может наступить позже.

Трактовка результатов

Если наблюдается агглютинация эритроцитов (агглютинаты видны в виде комочков на просветленном или полностью обесцвеченном фоне), это указывает на то, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не может быть ему перелита.

Если взвесь эритроцитов осталась гомогенно окрашенной, без признаков агглютинации, это значит, что кровь больного не содержит неполных антител к эритроцитам донора в отношении резус-фактора и других аллоантигенов, к которым могли образоваться антитела неполной формы.

Непрямая проба Кумбса является чувствительной только в отношении неполных антител.

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 617 | Нарушение авторских прав