АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Изучение функционирования ЦТК по образованию углекислого газа
Принцип метода. При окислении ацетил-КоА в ЦТК образуется углекислый газ, который связывается гидроксидом кальция и определяется при добавлении серной кислоты по выделению пузырьков газа.
Ход работы. В две пробирки вносят реактивы согласно таблице:
№ п/п
| Содержимое пробирок
| Контроль
| Опыт
| 1.
| Фосфатный буфер рН=7.4
| 2,0 мл
| 2,0 мл
| 2.
| Р-р ацетил-КоА
| 0,5
| 0,5
| 3.
| Р-р оксалоацетата
| 0,5
| 0,5
| 4.
| Р-р малоновой кислоты
| 1,0
| —
| 5.
| Инкубационный раствор
| —
| 1,0
| 6.
| Р-р Са(ОН)2
| 1,0
| 1,0
| 7.
| Гомогенат печени
| 0,5
| 0,5
| Инкубация 10 минут при комнатной температуре
| 8.
| 0.1н р-р серной кислоты
| 1,0
| 1,0
| Результат (выделение углекислого газа):
Выводы:
Лабораторная работа № 5.
Изучение функционирования ЦТК по образованию атомов водорода
Принцип метода. При окислении ацетил-КоА в ЦТК образуется 8 атомов водорода, которые отщепляются при участии соответствующих дегидрогеназ, в качестве акцептора используется 2.6-дихлорфенолиндофенол (2.6-ДХФИ). Если цикл функционирует, то 2.6-ДХФИ восстанавливается и обесцвечивается.
Ход работы. В две пробирки вносят реактивы согласно таблице:
№ п/п
| Содержимое пробирок
| Контроль
| Опыт
| 1.
| Фосфатный буфер рН=7.4
| 2,0 мл
| 2,0 мл
| 2.
| Р-р ацетил-КоА
| —
| 0,5
| 3.
| Р-р ЩУК
| —
| 0,5
| 4.
| Дистиллированная вода
| 1,0
| —
| 5.
| Гомогенат печени
| 1,0
| 1,0
| 6.
| 0,001н р-р ДХФИ
| 1,0
| 1,0
| Инкубация 15-20 минут при комнатной температуре
| Результат (окраска растворов):
Выводы:
III. Рекомендуемая литература
- Биологическая химия: учебник / В.К. Кухта, Т.С. Морозкина, Э.И. Олецкий, А.Д.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 585 | Нарушение авторских прав
|