Оценка результатов. 1. Считать не менее 200 клеток, сопоставляя фазовоконтрастную (световую) и флюоресцентную картину каждого поля зрения
1. Считать не менее 200 клеток, сопоставляя фазовоконтрастную (световую) и флюоресцентную картину каждого поля зрения, определяя количество клеток, содержащих специфическую флюоресцентную метку: 
 Следует соблюдать следующий порядок в оценке результатов: 
 1. Просмотреть и подсчитать клетки в отрицательном и положительном контроле. В положительном контроле все клетки должны экспрессировать общелейкоцитарный маркер CD45. В отрицательном контроле (IgG1 мыши) положительных клеток не должно быть. В случае обнаружения положительных клеток в отрицательном контроле необходимо устранить неспецифическое связывание (Табл.1 в Приложении). 
 2. При световой микроскопии подсчитать 200 мононуклеаров и среди них, при флюоресцентной микроскопии, определить количество клеток, экспрессирующих моноцитарный маркер (CD14+ клетки). 
 3. При световой микроскопии подсчитать 200 мононуклеаров и среди них, при флюоресцентной микроскопии, определить количество клеток экспрессирующих антигены МНС класса II (HLA DR+ клетки). 
 4. При световой микроскопии подсчитать 200 лимфоцитов и среди них, при флюоресцентной микроскопии,* определить количество клеток, экспрессирующих В-клеточные антигены (например, CD19, CD20, CD22). 
 5. При световой микроскопии подсчитать 200 лимфоцитов и среди них, при флюоресцентной микроскопии, определить количество клеток, экспрессирующих Т-клеточные антигены (например, CD7, CD3, CD4, CD8). 
 6. При световой микроскопии подсчитать 200 лимфоцитов и среди них, при флюоресцентной микроскопии, определить количество клеток, экспрессирующих маркеры активации (например, CD25, CD38, CD71). 
 7. При световой микроскопии подсчитать 200 мононуклеаров и среди них, при флюоресцентной микроскопии, определить количество клеток экспрессирующих дополнительные молекулы (например, CD28, CD40, СD54, CD80, CD86, CD95 и т.п.). 
 8. Записать результаты в рабочий журнал. 
   
 *- здесь и далее при указании на подсчет в световом поле лимфоцитов, моноциты в счет не включать. 
   
					Выделение мононуклеарной фракции крови и костного мозга по методу Boyum (Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow //Scand.J.Clin.Lab.Investig.-1968.-Vol.21-Suppl.97.p.1-9) 
 Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 520 | Нарушение авторских прав 
 
 
 
  
 |