На сегодняшний день разработаны методы активации Т-клеток вне организма.
Традиционный метод активации Т-клеток in vitro можно проводить двумя способами:
1. с использованием собственных мононуклеаров, антигена и пролейкина,
2. с использованием мононуклеаров донора, фитогемаглютинина (митоген) и пролейкина.
Кроме того, чтобы запустить процесс пролиферации очищенных Т клеток in vitro необходимо иметь антигенпрезентирующие клетки (АПК),например, дендритные клетки, выделение которых является весьма трудоемким процессом.
Таким образом, при in vitro активации Т-клеток можно столкнуться с рядом сложностей:
· Выделение мононуклеаров требует много времени.
· При многих болезнях мононуклеары могут присутствовать в организме в очень малом количестве.
· Количество антигена для стимуляции при многих заболеваниях, например при ВИЧ, должно быть небольшим.
· Антигенная специфичность часто теряется во время повторных стимуляций митогеном.
На сегодняшний день существует современная технология активации Т-клеток с помощью магнитных частиц, содержащих на своей поверхности антитела к CD3 и CD28. Такие частицы за счет присутствия специфических антител связываются с CD3 и CD28 поверхностными антигенами Т клеток, то есть фактически мимикрируют под АПК. Данный метод не требует поддержания в среде аутологичных антигенпрезентирующих клеток и антигена, что делает стимуляциию Т клеток надежной и воспроизводимой.
Метод активации Т-клеток магнитными частицами CD3/CD28 имеет целый ряд преимуществ:
· Этот метод является универсальным, в его основе лежит простая технология.
· CD4+ и CD8+ T клеточные клоны сохраняют антигенную специфичность после 4-5 рестимуляций магнитными частицами CD3/CD28 Dynabeads.
· Метод предотвращает взаимодействия между CTLA4 на T клетках и B7 на антигенпрезентирующих клетках (CTLA4 передает отрицательный сигнал T клеткам).