Акушерство Анатомия Анестезиология Вакцинопрофилактика Валеология Ветеринария Гигиена Заболевания Иммунология Кардиология Неврология Нефрология Онкология Оториноларингология Офтальмология Паразитология Педиатрия Первая помощь Психиатрия Пульмонология Реанимация Ревматология Стоматология Терапия Токсикология Травматология Урология Фармакология Фармацевтика Физиотерапия Фтизиатрия Хирургия Эндокринология Эпидемиология

ТЕМА: Бактериофаги

Прочитайте:

Цель: 1. Определить практическое значение бактериофагов для медицины.

2. Овладеть методами диагностики с использованием бактериофагов.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА.

Бактериофаги – вирусы бактерий, специфически взаимодействующие с бактериальной клеткой. По типу взаимодействия различают вирулентные и умеренные бактериофаги. Вирулентные бактериофаги в результате своей репродукции вызывают лизис бактериальной клетки и используются в диагностике для фаготипирования бактерий, а также для экстренной специфической профилактики и специфической терапии инфекций. Умеренные бактериофаги интегрируются в геном бактериальной клетки (профаги) и могут вызывать изменение ее свойств – лизогенную конверсию. Явление лизогении и умеренные бактериофаги широко используются в генной инженерии в качестве материала и средства управляемой генетической изменчивости. Вирулентные бактериофаги для диагностики и для создания лечебно-профилактических преператов получают путем фильтрования фаголизата бактерий соответствующих видов. Умеренные бактериофаги получают путем облучения ультрафиолетовыми лучами лизогенных культур бактерий.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ.

1. Структура бактериофага.

2. Этапы взаимодействия бактериофага и клетки бактерии.

3. Умеренные и вирулентные бактериофаги, их практическое использование в медицине.

4. Роль бактериофагов в изменчивости бактерий.

ПЛАН САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

1. Определить фаготип исследуемой культуры (демонстрация) (Работа 1).

2. Оценить явление трансдукции (демонстрация) (Работа 2).

3. Изучить препараты бактериофагов для диагностики, лечения и профилактики бактериальных инфекций. (Работа 3).

САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ ЗАДАНИЯ

Работа 1

Цель: Определить фаготип исследуемой культуры.

Задача. В районе произошла вспышка брюшного тифа. Из воды у места водозабора выделен возбудитель S.typhi. С целью установления пути распространения инфекции рекомендовано определить фаготипы выделенных бактерий (из воды и от больных людей). Оцените результат. Сделайте вывод.

Методика:

1. На чашки Петри засевают шпателем взвеси исследуемых культур.

2. На засеянную поверхность агара пастеровскими пипетками наносят аккуратными каплями сальмонеллезные индикаторные бактериофаги различных типов. Места нанесения фагов маркируют на дне чашки. Пипетки и шпатель помещают в стакан с дезраствором.

3. Посев помещают в термостат на 24 часа.

4. Через сутки учитывают результат. На поверхности выросших исследуемых культур определяют зоны лизиса бактерий соответствующим типом фага (Рис.2.10.).

5. Сравнивают фаготипы выделенных из разных источников культур бактерий.

Результат выполненной работы оформляют в виде протокола исследования.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Цель:

Вид возбудителя	Результат
Исследуемая культура № 1 (вода) (рис. с обозначениями)	Исследуемая культура № 2 (больной А) (рис.с обозначениями)

Вывод: (ответить на вопросы: Явилась ли вода фактором распространения данной инфекции? Почему?).

Работа 2

Цель: Оценить результаты опыта по трансдукции

Методика.

1. Для проведения опыта в качестве реципиента берут штамм кишечной палочки, не сбраживающий лактозу (E.coli lac-), и фаголизат, содержащий умеренный бактериофаг, полученный при облучении УФЛ штамма E.coli lac+.

2. Культуру реципиента и фаголизат смешивают и инкубируют 15 минут в термостате.

3. Делают высевы на среду Эндо из пробирки с культурой-реципиентом (контороль) и из опытной пробирки. Посевы инкубируют в течение суток.

Оцените результат опыта, оформите протокол.

Схема опыта.

1 2

1. Культура-реципиент E.coli lac-