Метод уропепсин
Метод Туголукова.
Принцип. Пепсин, находящийся в содержимом желудка, расщепляет субстрат – сухую плазму; об активности пепсина судят по количеству нерасщепившегося субстрата, осажденного трихлоруксусной кислотой.
Уропепсин определяют либо в суточном количестве мочи, либо в моче, полученной натощак. В последнем случае активность пепсиногена выражают в миллиграммах в 1 ч; для этого регистрируют время 1-го и 2-го мочеиспусканий и объем мочи при 2-м мочеиспускании.
Ход определения. В градуированную центрифужную пробирку наливают 1 л мочи, взятой из суточного количества или полученной натощак. Эту пробирку обозначают как «опытную». В другую такую же пробирку наливают 1 мл предварительно прокипяченной мочи. Эту пробирку обозначают как «контрольную». В каждую пробирку приливают по 2 мл 2 % раствора сухой плазмы. Обе пробирки ставят в термостат при 37 °С на 20 ч. После этого в каждую пробирку наливают по 2 мл 10 % раствора трихлоруксусной кислоты. Содержимое пробирок перемешивают стеклянной палочкой до получения однородной суспензии и центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. Определяют величину осадка в опытной и контрольной пробирках. Установленные цифры записывают. Затем производят расчет показателя переваривания субстрата М по формуле:
М = (А - В) х40/А
(обозначения показателей формулы см. выше). По табл. 2.7 находят содержание пепсиногена в миллиграммах в 1 мл мочи. Чтобы узнать, какое количество уропепсина содержится в суточной моче, полученный результат умножают на количество мочи, собранной за сутки (суточное количество мочи измеряют в градуированном цилиндре). Содержание пепсиногена в моче, полученной натощак, определяют по формуле:
у ■ п/Т
где у — объем мочи при 2-м мочеиспускании, мл; п — содержание пепсиногена в 1 мл мочи, мг; Т — время между 1-м и 2-м мочеиспусканием, ч. Норма пепсиногена в суточной моче — 0,38—0,96 мг (в пересчете на чистый фермент). Норма пепсиногена в порции мочи натощак («часовое напряжение» пепсиногена) 2—3 мг/ч.
Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 1913 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 |
|