АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Реактивы

– фосфатный буферный раствор с рН 7,3…7,5;

– 5 %-ный раствор желатина (субстрат) – 5 г желатина предварительно замачивают в стеклянном стаканчике в 15…20 см³ дистиллированной воды в течение 20…30 мин. Набухший белок заливают 20…25 см³ буферного раствора температурой 70…80 ºС и тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Растворившуюся часть сливают в мерную колбу на 100 см³, к нерастворившейся части добавляют еще 20…25 см³ буферного раствора и снова переносят полученный раствор в эту же колбу. Так повторяют до полного растворения желатина. Охлажденный до 40 ºС раствор желатина доводят до метки буферным раствором такой же температуры. Готовый раствор желатина должен храниться в холодильнике при температуре от 2 до 5 ºС и может быть использован для анализа в течение 2 сут. Перед анализом раствор желатина нагревают до 40 ºС на водяной бане;

– 1 %-ный спиртовой раствор тимолфталеина – 1 г кристаллического тимолфталеина растворяют в 96 %-ном спирте-ректификате в мерной колбе на 100 см³ и после растворения доводят до метки, закрывают пробкой и хранят в тёмном месте;

– 96 %-ный этиловый спирт;

– основной раствор ферментного препарата готовят согласно методике, описанной в лабораторной работе № 1, но вместо дистиллированной воды используют буферный раствор;

– рабочий раствор готовят исходя из предположительной протеолитической активности ферментного препарата;

– солодовую вытяжку готовят следующим образом: 40…50 г солода измельчают на кофемолке, растертую массу перемешивают, от нее берут навеску 20 г, которую взвешивают на технических весах в стакане 150…200 мл. Приливают 40 мл 0,5 %-ного раствора хлорида натрия и 60 мл дистиллированной воды, перемешивают стеклянной палочкой и выдерживают в воздушном термостате при 37 ºС в течение 60 мин. Затем содержимое стакана фильтруют сначала через полотняный, а затем через бумажный фильтр. Фильтрат используют в качестве основного раствора для получения рабочего раствора.

Рабочий раствор готовят путём разбавления дистиллированной водой до 25…50 мл различного количества основного раствора в зависимости от протеолитической активности исследуемого солода.

Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 583 | Нарушение авторских прав