АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Проведение анализа

К 10 см³ 5 %-ного раствора желатина с рН 7,3…7,5 приливают 2 см³ испытуемого ферментного раствора и сразу же отбирают 1 см³ реакционной смеси в коническую колбу на 50…100 см³, куда предварительно налито 20 см³ 96 %-ного этилового спирта и 0,2 см³ 1 %-ного раствора тимолфталеина. Пробу тут же титруют 0,1 н раствором NaOH. После появления голубой окраски в растворе прибавляют еще 4 капли щелочи и на этом титрование заканчивают. Титрование проводят из микробюретки с ценой деления 0,02 см³.

Оставшуюся смесь желатина с ферментным раствором помещают в термостат с температурой 40 ºС для гидролиза. Через 4 ч 1 см³ реакционной смеси отбирают во вторую коническую колбочку на 50…100 см³, куда предварительно налито 20 см³ 96 %-ного этилового спирта и 0,2 см³ 1 %-ного раствора тимолфталеина, и титруют аналогично контролю.

Расчёт протеолитической активности ПС ведут по формуле (10)

, (10)

где А – количество аминного азота, накопленное за время опыта в реакционной смеси, мг;

t – время протеолиза, ч;

Р – коэффициент, учитывающий разведение и пересчет на 1 г препарата или 1 см³ жидкого ферментного раствора.

Величина А рассчитывается по формуле (11)

(11)

где а – количество 0,1 н раствора NaOH, пошедшее на титрование 1 см³ опытной пробы, см³;

– то же, для контрольной пробы;

1,4 – коэффициент пересчёта количества 0,1 н раствора щелочи в миллиграммы азота аминокислот и полипептидов;

К – поправка к титру щелочи.

Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 517 | Нарушение авторских прав