АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Рекомендации по получению плазмы для исследования гемостаза
Лабораторная диагностика нарушений гемостаза весьма чувствительна к соблюдению известных правил взятия, хранения и подготовки крови для исследования. Безусловное значение для качественного обследования имеют адекватная подготовка больного к сдаче крови, сама методика кровопускания и стабилизации крови. Состояние стресса (психологического или физического) может вызвать повышение агрегационных свойств тромбоцитов и тромбинемию. В некоторых клинических ситуациях, например при шоке, извлечение крови из локтевой вены затруднительно из-за низкого давления. Попытки медленно набрать кровь с помощью шприца часто заканчиваются неудачей – кровь свертывается. В таких случаях можно прибегнуть к взятию крови из подключичного катетера, однако следует помнить о возможности загрязнения такой крови гепарином. Кровь берут утром натощак из локтевой вены иглой с широким просветом (0,8 мм). Допустимо лишь кратковременное наложение жгута. Использование шприца недопустимо из-за активации тромбоцитов и факторов свертывания турбулентным движением крови и ее смешивания с воздухом (вспенивания).
Использование вакуумных пробирок, предназначенных для получения венозной крови, стабилизированной цитратом в соотношении 9:1, имеет большие преимущества из-за хорошей стандартизации процедуры и соответствия санитарным нормам, но является малоприемлемым в случае существенных отклонений гематокрита при анемии или полиглобулии (полицитемии). При высоком гематокрите (свыше 70%) в плазме крови создается избыточная концентрация цитрата, приводящая к «ложной» гипокоагуляции, напротив, при снижении гематокрита (ниже 35%), например при анемии, обнаруживается «ложная» гиперкоагуляция, и кровь при ее смешивании с цитратом в отношении 9:1 может свернуться в пробирке еще до исследования. При подозрении на заболевания, сопровождающиеся анемией или полиглобулией, рекомендовано перед сдачей крови на параметры гемостаза провести исследование показателя гематокрита. Перерасчет обьема стабилизатора в соответствии с показателем гематокрита позволяет избежать этой ошибки (табл. 9).
Кроме того, существуют специальные требования пробоподготовки для отдельных тестов:
· Из-за быстрой инактивации тканевого активатора плазминогена ТАП ингибиторами пробы крови необходимо немедленно закислить, чтобы предупредить инактивацию ТАП in vitro. В настоящее время выпускаются специальные пробирки с кислым антикоагулянтом.
· Ингибитор активатора плазминогена 1 типа ПАИ-1 - один из самых неустойчивых белков плазмы, поэтому определение необходимо проводить сразу после взятия крови, транспортировка может привести к потере активности ПАИ-1 в пробе. Содержание ПАИ-1 в системе циркуляции подвержено суточным ритмам, поэтому пробы при системном анализе необходимо брать в одно время суток, лучше по утрам.
· При назначении определения волчаночного антикоагулянта по возможности необходимо отменить больному прием гепарина за 2 дня и отменить кумариновые препараты за 2 недели до взятия крови, так как присутствие этих препаратов в крови может давать ложноположительные результаты. Если отменить данные препараты невозможно, о их приеме необходимо указать на направлении.
· Активность протеина С следует определять до начала лечения антикоагулянтами непрямого действия и контролировать во время лечения.
Таблица 9. Соотношение объемов 3,8%-ного раствора цитрата натрия и крови в зависимости от величины гематокрита
Показатель гематокрита, %
| Объем цитрата, мл
| Объем крови, мл
| 20-21
| 1,4
| 8,6
| 22-27
| 1,3
| 8,7
| 28-33
| 1,2
| 8,8
| 34-39
| 1,1
| 8,9
| 40-45
| 1,0
| 9,0
| 46-51
| 0,9
| 9,1
| 52-57
| 0,8
| 9,2
| 58-60
| 0,7
| 9,3
| Более 65
| 0,5
| 9,5
|
Литература
· Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. М., 2001.
· Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. М., 2005.
· Момот А.П. Патология гемостаза принципы и алгоритмы клинико-лабораторной диагностики. СПб., 2006.
· Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. М., 2006.
· Папаян Л.П. Новое в представлении процесса свертывания крови // Трансфузиология. 2004. Т. 5, № 3. С. 7-22.
· Сидельникова В. М., Кирющенков П. А. Гемостаз и беременность. — М.: Триада-Х, 2004.
· Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. СПб.: ГМУ, 2000.
· Hemostasis and Thrombosis. Basic Principles and Clinical Practice. Editors: Robert W. Colman and others. 2001.
· Hemostasis and Thrombosis 2nd Edition. T.G. DeLoughery. Landes Bioscience p.218. 2004.
· www.coagulometers.ru
· www.trombozu.net
Приложение 1 Устаревшие методы исследования гемостаза и их современные аналоги [3]
Метод исследования
| Недостаток
| Современный метод
| Подсчет количества тромбоцитов в мазке крови по Фонио (на 1000 эритроцитов)
| Низкая точность определений, но метод информативен при оценке морфологии тромбоцитов в случае дифференциальной диагностики тромбоцитопатий
| Определение числа тромбоцитов в крови с помощью гематологического анализатора либо фазово-контрастной микроскопии в камере Горяева
| Определение времени свертывания крови
| Низкая стандартизация
| АПТВ
| Определение времени рекальцификации
| Низкая стандартизация
| АПТВ
| Аутокоагуляционный тест*
| Низкая стандартизация
| АПТВ+ определение активности АТ III
| Фибриноген В, этаноловый тест, протаминсульфатный тест
| Малоинформативное, качественное выражение результатов («+» или «-»), возможность получения ложных результатов
| Тесты на маркеры тромбинемии. Наиболее доступный орто-фенантролиновый тест (РФМК) с количественным выражением результатов
| Определение толерантности плазмы к гепарину (на базе теста рекальцификации бедной тромбоцитами плазмы)
| Низкая точность (нестандартизированность) и длительность определений, влияние на результаты разнообразных нарушений внутреннего механизма свертывания
| Оценка чувствительности плазмы к гепарину на основе тромбин-гепаринового времени свертывания со стандартной активностью тромбина и гепарина
| Концентрация фибриногена в плазме по Р.А. Рутберг (гравиметрический вариант)
| Низкая стандартизация, возможность ложного занижения результатов при гипофибриногенемии и, наоборот, завышения при гиперфибриногенемии; грубое нарушение санитарных норм работы с плазмой крови
| Концентрация фибриногена в плазме (хронометрический вариант по Клауссу) с использованием коагулометра любой конструкции
| Определение активности фактора XIII по лизису фибринового сгустка в растворе 5М мочевины
| Низкая чувствительность (выявляется только патология с активностью фактора 1-2% от нормы), влияние на результаты исследования концентрации фибриногена
| Фотометрическое определение активности с применением специфических к фактору XIIIа субстратов
| * Остается методом выбора для использования в неонатологии
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 816 | Нарушение авторских прав
|