Да. Бактерии не получившие плазмиду, растут на среде LB без антибиотика.
6. Можете ли вы сказать, глядя на чашку LB, являются ли растущими на ней бактерии устойчивыми к ампициллину?
Нет. Нельзя сказать, являются ли эти бактерии устойчивыми к ампициллину, так как и устойчивые, и неустойчивые бактерии внешне выглядят одинаково – сравните колонии на «стартовой» чашке LB и колонии на чашке (+)pGLO LB/amp
7.Как вы измените условия выращивания бактерий, чтобы выяснить, устойчивы ли они к ампициллину?
Лучше всего взять часть бактерий с чашки LB и посеять на чашку LB/amp. Если бактерии растут на среде с ампициллином, значит, они устойчивы к нему. Если колонии не вырастут, значит, эти бактерии чувствительны к ампициллину.
8.Часто внешние признаки организма являются проявлением взаимодействия генов с конкретными условиями окружающей среды. Подумайте про зеленый цвет колоний некоторых трансформированных бактерий:
А. Какие два фактора необходимы, чтобы увидеть зеленый цвет? (подсказка: один фактор присутствует на чашке,второй – как вы смотрите на чашки)
Сахар арабиноза, присутствующий на чашке, необходим для того,чтобы включить экспрессию гена зеленого флуоресцентного белка. Ультрафиолет необходим, чтобы зеленый флуоресцентный белок в клетках бактерий начал светиться.
Б. Как вы думаете, как работает каждый из этих двух факторов?
Арабиноза связывается с белком araC, находящимся на промоторе PBAD. При этом araC изменяет свою конформацию (трехмерную структуру) и становится способна помочь РНК-полимеразе связаться с промотором и начать транскрипцию (см. детальное описание в приложении D). При поглощении ультрафиолета (невидимого коротковолнового света), электроны в хромофорной (дающей цвет) группе GFP возбуждаются (переходят в высокоэнергетическое состояние). Затем они отдают поглощенную энергию, испуская свет флуоресценции более длинной длины волны (то есть несущий меньшую энергию). Это видимый зеленый свет с длиной волны 509 нм.
В. Какое преимущество дает организму способность включать или выключать свои гены в зависимости от определенных внешних условий?
Регуляция работы генов позволяет организму адаптироваться в разным внешним условиям и при этом не тратить ресурсы на производство не нужных в данных конкретных условиях белков. Хорошим примером строго регулируемых генов являются гены отвечающие за «переработку пищи» - катаболизм углеводов. Если сахар арабиноза присутствует в среде, бактерии выгодно экспрессировать ферменты, необходимые для того, чтобы использовать этот потенциальный источник энергии. С другой стороны, если арабинозы в среде нет, производить ферменты для переработки арабинозы значит наоборот тратить энергию зря.
Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 487 | Нарушение авторских прав
|