АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Урок 3 Сбор и анализ данных

Прочитайте:
  1. B) Нарушение анализа смысловых структур у больных с поражением лобных долей мозга
  2. G. Оценка данных осмотра.
  3. II. Анализ ритма
  4. II. Анализ ритма
  5. IV. Анализ Конвенции 20 марта 1883 г.
  6. IV. Анализ предложенного определения
  7. V. Требования к водоснабжению и канализации
  8. VI. Синдромология и структурный анализ Бирнбаума и Кречмера (наследственно-биологический структурный анализ)
  9. VIII. Сбор данных
  10. VIII. Требования к водоснабжению и канализации.

 

  1. Осмотрите и зарисуйте, что вы видите на каждой чашке. Поместите ваши рисунки в таблицу с данными в колонку. Вы можете также сфотографировать чашки и поместить фотографии в ваш протокол. Запишите данные ваших наблюдений, чтобы сравнить клетки «+pGLO» с нетрансформированными клетками. (см. ниже)

 

  1. Сравните рост бактерий на чашках

 

На обеих чашках с плазмидой pGLO (LB/amp/ara и LB/amp) должны быть множественные колонии (~75). На чашке LB/amp/(-)pGLO не должно быть колоний. На чашке LB/(-)pGLO должен быть сплошной слой бактерий (газон).

  1. Какого цвета колонии бактерий?

 

Бактерии на чашках (+)pGLO LB/amp и и (-)pGLO/LB должны быть белыми. Бактерии на чашке (+)pGLO LB/amp/ara могут казаться белыми или зеленоватыми при обычном освещении, но должны светиться ярко-зеленым под ультрафиолетом.

 

  1. Сосчитайте число колоний на каждой чашке (число отдельных точек)

 

На каждой из чашек (+)pGLO должно быть около 75 колоний. На чашке LB растет газон и сосчитать колонии невозможно.

Чашка Наблюдения
+pGLO, LB/amp Много колоний трансформированных бактерий. (~75). Колонии белые
+pGLO, LB/amp/ara Много колоний трансформированных бактерий. (~75). Колонии кажутся белыми при обычном освещении, но светятся ярко-зеленым под УФ
-pGLO, LB/amp Нет роста бактерий
-pGLO, LB Сплошной желтовато-белый слой бактерий

 

  1. Какие из первоначальных признаков, которые вы выделили у E. coli не изменились в результате трансформации? В пространстве внизу перечислите эти признаки и как вы пришли к этим выводам (результаты наблюдений)

 

Признак Анализ наблюдений
Цвет Колонии белого цвета до и после трансформации
Размер колоний Размер колоний одинаковый до и после трансформации

 

 

  1. Какие из признаков E. coli изменились в результате трансформации? Перечислите эти признаки и результаты наблюдений, из которых вы сделали ваши выводы.

 

Признак Анализ наблюдений
Цвет Колонии на чашке LB/amp/ara светятся зеленым под ультрафиолетом
Устойчивость к ампициллину Трансформированные клетки могут расти в присутствии ампициллина

 

 

  1. Если генетически трансформированные клетки приобрели устойчивость к антибиотику ампициллину, что можно предположить о генах, находящихся на плазмиде?

 

Плазмида должна содержать ген устойчивости к ампициллину, это ген bla, кодирующий белок бета-лактамазу, разрушающий ампициллин.

 

 

  1. Как, исходя из ваших результатов, вы можете заключить, что наблюдаемые вами изменения являются следствием проведенной вами процедуры?

 

Лучший способ сделать это – сравнить контроль и опыт. Клетки, которые не получили плазмиду (-pGLO) не могут расти на ампициллине, тогда как, клетки содержащие плазмиду (+pGLO) могут расти на чашках LB/amp. Таким образом, плазмида придает клеткам устойчивость к ампициллину.

 

Вопросы к уроку 3

 

  1. Что светится?

 

Вспомните, что вы наблюдали,когда смотрели на ДНК pGLO под ультрафиолетом. Опишите ваши наблюдения.

 

Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 478 | Нарушение авторских прав

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)