Мазок периферической крови на малярию: приготовление и окраска.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА КРАСКИ РОМАНОВСКОГО
Краска Романовского (правильнее — по Романовскому — Гимзе) состоит из двух красящих веществ — азура и эозина, разведенных метанолом или этанолом с добавлением глицерина. Заводская краска (азур-эозин по Романовскому) поступает в сухом или жидком виде.
Для разведения сухой краски рекомендуется 5 г ее тщательно растереть в фарфоровой ступке с постепенным добавлением 50 мл глицерина, а затем 450 мл 96 % этанола. По мере растирания смесь сливают в колбу, встряхивают не менее 10 мин, а при наличии аппарата для встряхивания или магнитной мешалки — в течение нескольких часов. Затем помещают в термостат при температуре 37 °С на 3—5 дней для созревания краски.
Встряхивание повторяют ежедневно. Готовый раствор краски фильтруют через бумажный фильтр.
Хранят краску в хорошо закупоренной темной бутыли отдельно от кислот и щелочей, в защищенном от света месте. Если при длительном хранении краски образуется осадок, то рекомендуется ее профильтровать.
Для приготовления рабочего раствора краску Романовского разводят дистиллированной водой, причем краску добавляют к воде, а не наоборот. При получении новой серии предварительно готовят несколько разведений'жидкой краски — по 1, 2 и 3 капли на 1 мл дистиллированной воды и окрашивают несколько мазков крови. По наиболее хорошо окрашенному мазку определяют, какое количество капель жидкой краски следует брать и сколько времени необходимо красить. По стандартной методике рекомендуется брать 3 мл концентрированной краски на 100 мл раствора или 1—2 капли краски на 1 мл раствора.
На качество окраски влияет реакция дистиллированной воды.
Алгоритм работы:
1.Несколько чистых предметных стекол положить на стол.
2.Ватой смоченной 70 % спиртом, протереть концевую фалангу IV пальца левой руки.
3.После высыхания спирта проколоть кожу пальца с ладонной стороны копьем.
4.Выступившую первую каплю крови снять сухой ватой.
5.Нажимая на боковые поверхности пальца по направлению к месту прокола (палец пациента при этом держат опущенным) выдавить крупную каплю крови, расположив ее на 1 см от узкого края стекла.
6.Шлифовальным стеклом растягивают каплю крови справа налево, получая тонкий мазок.
7.Высушенный на воздухе мазок крови фиксируют 96 % этиловым спиртом в течение 15 мин. или смесью Никифорова (спирт и эфир в равных соотношениях) в течение 20 мин.
8.Фиксированные мазки фиксируют на воздухе и окрашивают по методу Романовского-Гимзе.
9.Промывают водой.
10.Микроскопируют под иммерсией (*90).
Дата добавления: 2015-12-15 | Просмотры: 2122 | Нарушение авторских прав
|