Влияние рН на скорость ферментативных реакций
Все ферменты проявляют максимальную активность при определенном оптимальном значении рН. Ниже и выше оптимума рН наблюдается снижение активности ферментов. Зависимость активности от рН объясняется влиянием на степень ионизации ионогенных групп фермента, а также субстрата.
Оптимум рН для действия амилазы слюны можно определить при взаимодействии ее с крахмалом при различных значениях рН среды. О степени расщепления крахмала можно судит по реакции крахмала с раствором йода. При оптимальном значении рН расщепление крахмала произойдет полностью (окраска с йодом отсутсвует). По мере удаления от оптимума рН в кислую или щелочную зоны расщепление крахмала произойдет только частично до стадии декстринов или крахмал вообще не подвергнется расщеплению.
Исследуемый материал: слюна.
Реактивы: 1 %-ный раствор крахмала, реактив Люголя, растворы фосфатного буфера с разными значениями рН (5,5-8,0).
Оборудование: пробирки, пипетки, термостат, электроплитка, водяная баня.
Ход работы. Наливают в 4 пробирки по 0,5 мл крахмала, 0,5 мл разбавленной (1:5) слюны. Затем в первую пробирку добавляют 0,5 мл буфера с рН 5,8, во вторую пробирку – 0,5 мл буфера с рН 6,5, в третью – 0,5 мл буфера с рН 7,0, и в четвертую – 0,5 мл буфера с рН 8,0. Помещают все пробирки на 10 мин в термостат (37˚ С). После этого добавляют по 2 капли реактива Люголя во все пробирки и наблюдают за развитием окраски.
Оформление работы. Результаты записывают в таблицу. Делают выводы о характере влияния рН на активность амилазы.
Таблица 3.2
Влияние рН на активность амилазы слюны
Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 640 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 |
|