Фазово-контрастное устройство
(рис. 7)обеспечивает четкое изображение объектов. В основе этого метода лежит изменение фазы световых лучей при прохождении их через прозрачные объекты. Как известно, человеческий глаз выявляет только различия в длине (цвет) и амплитуде (интенсивности) световой волны, но не в состоянии выявить различия в фазе. С помощью фазово-контрастного устройства различия в фазе превращаются в изменение амплитуды, в результате чего прозрачные объекты становятся видимыми человеческим глазом.
Другое полезное приспособление в микроскопии — специальный конденсор, создающий эффект так называемого темного поля. Темнопольный конденсор отличается от обычного тем, что пропускает только косые краевые лучи источника света, которые ввиду их сильного наклона не попадают в объектив, в результате чего поле зрения микроскопа остается темным.
Косые лучи, пропускаемые конденсором, проходят через препарат, содержащий частицы разной оптической плотности, огибают их, образуя волны дифрагированного света. В результате этого получается чрезвычайно контрастный препарат, на темном фоне которого видны окруженные сиянием плотные частички, например клетки бактерий (рис. 8).
Фазово-контрастное устройство включает в себя фазовую пластинку— расположенный в задней фокальной плоскости объектива прозрачный диск, на поверхность которого напылено кольцо из
. 7. Схема фазово-контрастного устройства:
I — кольцевая диафрагма; 2 — конденсор; 3 — объект; ^—объектив; 5 —фазовая пластинка
металла (фазовое кольцо); кольцевую диафрагму — помещенную под конденсором светонепроницаемую пластину с прозрачным кольцевидным участком.
Световая волна при прохождении через живую клетку отстает по фазе Приблизительно на '/4 Длины волны и дополнительно сдвигается еще на 'Д после прохождения через фазовую пластинку (см. рис. 7). Сдвинутые по фазе после прохождения через фазовую пластинку лучи либо совпадают и сливаются с прямыми лучами, идущими мимо объекта, либо оказываются в противо-фазе. В первом случае исследуемый объект виден как светлый на темном фоне, а во втором — как темный на светлом фоне. В микробиологии широко применяют фазово-контрастное устройство КФ-4 (см. рис. 7) (объект виден темным на светлом фоне).
Работа с фазово-контрастным устройством:
1. Обычный конденсор заменяют на фазово-контрастный, а объектив х40 — на аналогичный фазовый объектив.
2. Диск револьвера конденсора поворачивают до появления в окошечке цифры 0; диафрагму конденсора полностью открывают.
3. Используя объектив х8, устанавливают освещение по Келеру.
4. Обычный окуляр заменяют на вспомогательный и с помощью тубуса добиваются четкого изображения фазовой пластинки в виде темного кольца.
5. Устанавливают кольцевую диафрагму, соответствующую объективу х40. В этом случае наряду с темным кольцом фазовой ластинки можно видеть светлое кольцо диафрагмы.
6. При помощи центрировоч-ных винтов совмещают фазовое кольцо и кольцо диафрагмы.
Рис. 8. Ход лучей в темнолольных конденсорах:
а — параболоид- конденсор; 6~ кардиоид-конденсор; / — объектив; 2—иммерсионное масло; 3 — пренарат; ^ — зеркальная поверхность; 5 —диафрагма
Рис. 9. Оптическая схема люминесцентного микроскопа:
/ —ртутно-кварцевая лампа; 2— коллектор; 3 — кювета; 4—сменные светофильтры; 5— апергурная диафрагма; 6, 8— собирательные линзы; 7— полевая диафрагма; 9— светоотдели-тельная пластинка; 10— объектив; 11 — объект; 12— запирающий светофильтр (сменный); О —зеркало; 14— окуляр; /5— фотоокуляр (гомал); 16— фотопленка; 17— тепловые лучи лампы; i#— УФ-лучи; 19 — сине-фиолетовые лучи; 20— лучи люминесценции.
7. Вспомогательный окуляр заменяют обычным и микроско-пируют препарат. При работе с другими объективами устанавливают соответствующие диафрагмы.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 801 | Нарушение авторских прав
|