АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Фазово-контрастное устройство

(рис. 7)обеспечивает четкое изображение объектов. В основе этого метода ле­жит изменение фазы световых лучей при прохождении их через прозрачные объекты. Как известно, человеческий глаз выявляет только различия в длине (цвет) и амплитуде (интенсивности) све­товой волны, но не в состоянии выявить различия в фазе. С помо­щью фазово-контрастного устройства различия в фазе превраща­ются в изменение амплитуды, в результате чего прозрачные объекты становятся видимыми человеческим глазом.

Другое полезное приспособление в микроскопии — специ­альный конденсор, создающий эффект так называемого темного поля. Темнопольный конденсор отличается от обычного тем, что пропускает только косые краевые лучи источника света, которые ввиду их сильного наклона не попадают в объектив, в ре­зультате чего поле зрения микроскопа остается темным.

Косые лучи, пропускаемые конденсором, проходят через пре­парат, содержащий частицы разной оптической плотности, огиба­ют их, образуя волны дифрагированного света. В результате этого получается чрезвычайно контрастный препарат, на темном фоне которого видны окруженные сиянием плотные частички, напри­мер клетки бактерий (рис. 8).

Фазово-контрастное устройство включает в себя фазовую плас­тинку— расположенный в задней фокальной плоскости объекти­ва прозрачный диск, на поверхность которого напылено кольцо из

. 7. Схема фазово-контрастного устройства:

I — кольцевая диафрагма; 2 — конденсор; 3 — объект; ^—объектив; 5 —фазовая пластинка

металла (фазовое кольцо); кольцевую диафрагму — помещенную под конден­сором светонепроницаемую пластину с прозрачным кольцевидным участком.

Световая волна при прохождении через живую клетку отстает по фазе Приблизительно на '/₄ Длины волны и дополнительно сдвигается еще на 'Д после прохождения через фазовую пла­стинку (см. рис. 7). Сдвинутые по фазе после прохождения через фазовую пла­стинку лучи либо совпадают и сливают­ся с прямыми лучами, идущими мимо объекта, либо оказываются в противо-фазе. В первом случае исследуемый объект виден как светлый на темном фоне, а во втором — как темный на светлом фоне. В мик­робиологии широко применяют фазово-контрастное устройство КФ-4 (см. рис. 7) (объект виден темным на светлом фоне).

Работа с фазово-контрастным устройством:

1. Обычный конденсор заменяют на фазово-контрастный, а объектив х40 — на аналогичный фазовый объектив.

2. Диск револьвера конденсора поворачивают до появления в окошечке цифры 0; диафрагму конденсора полностью открывают.

3. Используя объектив х8, устанавливают освещение по Келеру.

4. Обычный окуляр заменяют на вспомогательный и с помо­щью тубуса добиваются четкого изображения фазовой пластинки в виде темного кольца.

5. Устанавливают кольцевую диафрагму, соответствующую объективу х40. В этом случае наряду с темным кольцом фазовой ластинки можно видеть свет­лое кольцо диафрагмы.

6. При помощи центрировоч-ных винтов совмещают фазовое кольцо и кольцо диафрагмы.

Рис. 8. Ход лучей в темнолольных конденсорах:

а — параболоид- конденсор; 6~ кардиоид-конденсор; / — объектив; 2—иммерсионное масло; 3 — пренарат; ^ — зеркальная поверх­ность; 5 —диафрагма

Рис. 9. Оптическая схема люминесцентного микроскопа:

/ —ртутно-кварцевая лампа; 2— коллектор; 3 — кювета; 4—сменные светофильтры; 5— апергурная диафрагма; 6, 8— собирательные линзы; 7— полевая диафрагма; 9— светоотдели-тельная пластинка; 10— объектив; 11 — объект; 12— запирающий светофильтр (сменный); О —зеркало; 14— окуляр; /5— фотоокуляр (гомал); 16— фотопленка; 17— тепловые лучи лампы; i#— УФ-лучи; 19 — сине-фиолетовые лучи; 20— лучи люминесценции.

7. Вспомогательный окуляр заменяют обычным и микроско-пируют препарат. При работе с другими объективами устанавли­вают соответствующие диафрагмы.

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 806 | Нарушение авторских прав