АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Сложные реакции
Сложные реакции называются так потому, что состоят из нескольких простых реакций.
Реакция связывания комплемента (РСК) предложена Ж. Бордё и О. Жангу. Реакция включает две фазы. В фазе I (специфической) искомый Аг (или AT) реагирует с диагностической антисывороткой (или Аг-диагностикумом) и комплементом. Образующийся комплекс Аг-АТ связывает комплемент. В фазе II (индикаторной) определяют наличие свободного комплемента внесением в реакционную среду гемолитической системы — эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, содержащей ATк ним. Если Аг и ATне соответствуют друг другу и не образуют иммунных комплексов, то связывания комплемента не происходит. В этом случае свободный комплемент взаимодействует с компонентами гемолитической системы, фиксируясь на комплексе эритроцит-антиэритроцитарное AT. Следствие этого — гемолиз индикаторных клеток (феномен «лаковой крови») — реакцию считают отрицательной. Если в фазе IATи Аг соответствуют друг другу, то образующиеся иммунные комплексы связывают комплемент, разрушения эритроцитов после внесения гемолитической системы не наблюдают и реакцию считают положительной.
Основные недостатки РСК: сложность (включает 5 компонентов), лабильность некоторых компонентов [их необходимо готовить прямо перед постановкой реакции (комплемент) либо за несколько суток (эритроциты барана)] и возможные антикомплементарные свойства у сывороток и Аг. Тем не менее РСК применяют в диагностике многих заболеваний, например при диагностике сифилиса (реакция Вассерманна).
Реакция радиального гемолиза в геле — вариант РСК. Принцип реакции основан на иммобилизации комплемента и Аг (эритроциты барана) в агаровом геле. Затем в геле нарезают лунки и вносят AT(например, гемолитическую сыворотку). Диффундирующие ATсвязывают Аг и комплемент, что проявляется появлением зон гемолиза. Их размеры пропорциональны титрам ATв сыворотке. В диагностических целях эритроциты барана «нагружают» Аг различных возбудителей (например, вирусов гриппа, краснухи), а в лунки вносят сыворотку больных.
Реакция локального гемолиза в геле предложена Н. Йёрне и А. Нордином (1963). Принцип аналогичен реакции радиального гемолиза, но в гель вносят эритроциты барана и суспензию клеток-антителопродуцентов. Последние секретируют AT, диффундирующие в агар и фиксирующиеся на эритроцитах. Затем в реакционную систему вносят комплемент (наслаивая его на агар) и наблюдают образование зон гемолиза вокруг каждой клетки, образующей ATк эритроцитам барана. Метод получил широкое распространение во многих областях иммунологии, так как даёт возможность оценивать образование ATна уровне отдельных тканей и клеточных популяций после различных воздействий. Метод позволяет определять динамику образования антителообразующих клеток к различным Аг, связывая их с эритроцитами, а также определять классы образуемых Ig.
Определение принадлежности ATк тому или иному классу Igимеет большое диагностическое значение, так как позволяют определить фазу инфекционного процесса. На базе классических серологических реакций доступна унитиоловая проба, в основу которой положена способность унитиола расщеплять дисульфидные (S-S) мостики в молекулах IgM, но не IgG. Первоначально в порции сыворотки определяют общие титры AT(например, в РИГА), затем в неё вносят унитиол и после инкубации снова определяют титры AT. Разницу между титрами первого и второго измерения составляют титры IgM.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 663 | Нарушение авторских прав
|