КЛОНИРОВАНИЕ ЭМБРИОНОВ МЛЕКОПИТАЮЩИХ
Истинные клоны позвоночных животных — амфибий были получены путем пересадки ядер соматических клеток в энуклеи-рованные яйцеклетки. Получение эмбриональных клонов основано на свойстве тотипотентности эмбриональных клеток.
В 1952 г. Р. Бриггс и Т. Кинг разработали метод пересадки ядер соматических клеток зародышей в энуклеированные яйцеклетки лягушек. Дж. Гёрдон в 1962 г. усовершенствовал технику пересадки. Он разрушал ядра яйцеклеток лягушки ультрафиолетовыми лучами, затем в каждое из яиц вводил ядро из дифференцированной клетки кишечного эпителия плавающего головастика (рис. 29). В ряде случаев такие ядра вызывали развитие генетически идентичных эмбрионов и взрослых лягушек. Впервые были получены истинные клоны позвоночных животных. Затем был использован метод культивирования in vitro клеток кожи взрослых лягушек. Пересадка ядер из таких клеток привела к получению генетических клонов головастиков, но вероятность успеха при трансплантации ядер из клеток кожи взрослых лягушек очень мала. При использовании ядер соматических клеток взрослых животных развитие клонов ограничивалось стадией головастиков. Ядра взрослых организмов и даже поздних эмбрионов по каким-то причинам утрачивают свои потенции. В последние годы установлено, что в ядрах эритроцитов взрослых амфибий имеются гены, контролирующие развитие эмбриона до.стадии головастика, включение таких ядер в цитоплазму ооцитов ведет к реактивации репрессированных участков генома.
В последние 10 лет разработан метод пересадки ядер, сочетающий приемы микрохирургии и технику слияния клеточных фрагментов, начато проведение опытов по трансплантации ядер у овец и крупного рогатого скота.
Несмотря на сложность проведения работ по трансплантации ядер соматических клеток в энуклеированную зиготу, проблема эта является актуальной, так как открывает возможности копи-
{КС 9
Рис. 29. Серийные ядерные пересадки (по Дж. Гёрдову):
ЯР — яйцо-реципиент; ГД ЯСК — головастик—донор ядер соматических клеток; ЭЯР — энуклеированное яйцо-реципиент; ЯСК — ядра соматических клеток; Бл — бластула; КСЭ — клон серийных эмбрионов
рования выдающихся по продуктивности животных и создания стад с высоким генетическим потенциалом.
Клоны можно получить путем разделения эмбрионов на ранней стадии развития. Установлено, что, если количество клеток эмбриона (бластомеров) не превышает 16, они еще не дифференцированы. Это позволяет разъединять эмбрионы (бластулы) на 2 и большее число и получать однояйцевых близнецов. К настоящему времени получены монозиготные близнецы телят, жеребят, ягнят и поросят. В перспективе предполагается, что обеспечение оптимальных условий для культиви-
рования ранних эмбрионов in vitro создаст возможность выращивать половинки эмбрионов с последующим неоднократным их разделением, что позволит в значительной степени увеличить число годных для трансплантации зародышей, происходящих от одного эмбриона, и получить более многочисленные клоны эмбрионов у сельскохозяйственных животных, что будет способствовать более успешной их селекции.
Дата добавления: 2015-12-16 | Просмотры: 481 | Нарушение авторских прав
|