АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

ТРАНСГЕННЫЕ ЖИВОТНЫЕ

Трансгеноз — экспериментальный перенос генов, выделенных из определенного генома или искусственно синтезированных, в другой геном. Животные, в геном которых интегрируют чуже­родные гены, называют трансгенными. В ряде экспериментов было установлено, что мыши, развивающиеся из зиготы, в кото­рую была введена чужеродная ДНК, содержат в своем геноме фрагменты этой ДНК, а иногда у них происходит и экспрессия чужеродных генов. В 1980 г. Дж. Гордон с сотр. впервые показа­ли возможность трансформации мыши путем введения в пронук-леус оплодотворенной яйцеклетки мыши рекомбинантных моле­кул, содержащих ген тимидинкиназы (ген ТК) вируса герпеса. Лучшие результаты были получены при Микроинъекции реком-бинантной ДНК в мужской более крупный пронуклеус. Метод микроинъекции чужеродной ДНК в мужской пронуклеус зиготы используется в настоящее время у всех млекопитающих, включая сельскохозяйственных животных. Созданы линии трансгенных мышей, хоторые различались между собой структурой чужерод­ной ДНК. Мышам были введены гены: гемоглобина кролика, Р-глобина человека, лейкоцитарного интерферона человека, гор­мона роста крысы и человека.

Особого внимания заслуживает опыт Пальмитера и сотр., в котором осуществлена пересадка мышам гена гормона роста крысы. В этом случае промотор бактерий был непригоден. Для микроинъекции была создана рекомбинантная ДНК, состоящая из соединенных фрагментов различных генов: промоторной части гена — металлотионеина МТ-1 мыши и структурной части — гена гормона роста крысы, в котором собственные про­мотор и инициатор были удалены. В зиготы мыши инъецировали по 600 копий рекомбинантной ДНК. Получен 21 потомок. У семи мышей был обнаружен чужеродный ген — ген гормона роста крысы. Живая масса трансгенных мышат была в 1,8 раза больше, чем контрольных. Таких трансгенных животных назвали супермышами. В среднем у трансгенных мышей интегрируется 25—30 % копий введенной ДНК.

Успешные опыты с мышами способствовали проведению работ по получению трансгенных кроликов и сельскохозяйствен­ных животных. Схема получения трансгенных животных в ос­новном такая же, как и при работе с мышами. Она состоит из следующих этапов: 1) выбор, получение и клонирование чуже­родного гена; 2) получение зигот и выявление пронуклеусов; 3)

микроинъекция определенного числа копий генов в видимый пронуклеус; 4) трансплантация зиготы в половые пути гормо­нально подготовленной самки; 5) оценка родившихся животных по генотипу и фенотипу: интеграция чужеродной ДНК, экспрес­сия ДНК, влияние на признак (например, высокая интенсив­ность роста), установление наследования гена.

Наиболее трудной проблемой в опытах по переносу генов в ткани или организмы животных оказалась экспрессия внесенных генов. Выяснилось, что только четыре промотора (генов метал-лотионеина, трансферрина, иммуноглобулина, эластазы) из мно­гих исследованных способны активировать присоединенные к ним гены.

Трансгенные кролики были получены Р. Хаммером и Г. Бре-мом с сотр. Они производили микроинъекцию в пронуклеусы кроликов гена гормона роста человека. В нашей стране в отделе биотехнологии ВИЖа получена трансгенная крольчиха с интег­рацией и экспрессией гена гормона роста крупного рогатого скота (Ц. К. Эрнст и др., 1990).

В Австралии получили первых в мире трансгенных овец. В возрасте 2—4 лет трансгенные овцы в 1,5 раза превосходили по массе сверстников той же породы. Австралийские ученые пред­полагают ввести овцам и другие гены, которые должны привести к ускорению роста шерсти, усилению резистентности к болез­ням.

Трансгенные свиньи впервые были получены в лабораториях Р. Хаммера (1985) и Г. Брема (1986) на основе инъекции гормо­на роста человека. У некоторых таких свиней в плазме крови отмечался высокий уровень гормона роста человека. В нашей стране получены трансгенные свиньи на основе инъекции в зиготы гена гормона роста крупного рогатого скота.

При работе с крупным рогатым скотом, для того чтобы обна­ружить пронуклеусы, применяют ДНК-специфические флуорес­центные окраски и центрифугирование зигот. В 1987 г. родился первый трансгенный теленок молочно-мясного типа.

В порядке совершенствования процесса трансгеноза разраба­тывается метод оплодотворения яйцеклеток in vitro с помощью микроинъекции одного сперматозоида с включенной в него чу­жеродной ДНК.

В перспективе предполагается получение трансгенных живот­ных для производства новых продуктов, которые можно будет производить в промышленном масштабе, если они будут полез­ны с медицинской точки зрения. С этой целью будет использо­ваться рекомбинантная ДНК, с помощью которой от трансген­ных животных будут получать, например, из коровьего молока, крови или печени такие белки, как инсулин человека, интерфе­рон и гормоны. Разрабатывается биотехнология производства фактора свертывания крови из молока трансгенных овец. Пред-

•полагается, что фактор свертываемости, необходимый для лече­ния гемофилии, будет синтезироваться в клетках молочной желе­зы овец и переходить в молоко.

Внедрение современных биотехнологий — гибридизации со­матических клеток, клеточной и генной инженерии в сочетании с эмбриогенетической инженерией — определяет новые подходы в деле создания более устойчивых к болезням высокопродуктив­ных пород животных с признаками, которых не было у исходных пород или они были слабовыражены. Открываются новые пер­спективы для получения лекарственных веществ: гормонов, вак­цин, аминокислот, витаминов и т. д. Синтез генов и совершен­ствование методов их введения позволяют ввести в клетку на место поврежденных генов нормальные гомологи, что обеспечит лечение наследственных болезней. Широкое распространение получат способы нейтрализации действия вредных генов с помо­щью введения репрессоров.

Контрольные вопросы. 1. Что такое биотехнология и какова ее роль в ветери­нарии, животноводстве, медицине? 2. Что такое генная инженерия, какие задачи она решает? 3. Какие известны методы получения генов? 4. Как создаются рекомбинантные ДНК и с какой целью они вводятся в реципиентную клетку? 5. Что такое клеточная инженерия? 6. Какие задачи решает эмбриогенетическая инженерия? 7. В чем заключается клонирование эмбрионов? 8. Каких животных называют химерами и как их получают? 9. Как и с какой целью осуществляется трансгеноз?

Дата добавления: 2015-12-16 | Просмотры: 552 | Нарушение авторских прав