 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Ключевые слова и понятия.
Задачи
292 Организация и передача генетического материала
9. Методы работы с ДНК 293
ОГЛАВЛЕНИЕ Предисловие редактора перевода 5 Предисловие 7 1 Введение 13 Вирусы 14 Прокариоты: бактерии и сине-зеленые водоросли 17 Одноклеточные и многоклеточные эукариоты 18 Митоз 22 Мейоз 26 Значение мейоза 33 2 Менделевская генетика 37 Первые представления о наследственности 37 Открытие законов наследственности 38 Методы Менделя 39 Доминантность и рецессивность 40 Расщепление 42 Гены-носители наследственности 46 Независимое комбинирование 48 Тригибридные скрещивания 50 Множественные аллели 53 Генотип и фенотип 56 3 Хромосомные основы наследственности 64 Гены и хромосомы 64 Наследование, сцепленное с полом 67 Нерасхождение Х-хромосом 70 Вторичное нерасхождение 72 Сцепленное с полом наследование у человека и других видов 75 Y-хромосома 80 Определение пола 80 Отношение полов 84 4 Природа генетического материала 88 Бактерии как экспериментальный объект 89 Экспериментальные исследования бактериофагов 91 ДНК-трансформирующий фактор пневмококка 93 Нуклеиновые кислоты-наследственный материал вирусов 96 Химический состав и строение нуклеиновых кислот 100 Модель структуры ДНК Уотсона-Крика 104 Проверка модели Уотсона - Крика 108 Различные формы организации двухцепочечной ДНК 113
Оглавление 295 Организация ДНК в хромосомах 116 Общие особенности репликации ДНК 120 5 Геном эукариот 127 Рекомбинация сцепленных генов 129 Генетические карты 134 Трехфакторные скрещивания 135 Генетическая интерференция 137 Когда происходит кроссинговер? 139 Мейоз у грибов 140 Цитологические наблюдения кроссинговера 144 Корреляция между генетическими и цитологическими картами хромосом дрозофилы 145 Внеядерная наследственность 150 6 Тонкая структура гена 159 Бактериофаг как генетическая система 160 Система rII бактериофага Т4 161 Природа мутаций в области rII 163 Функциональные особенности rII -мутаций 166 Цистрон 168 Картирование rII -мутаций с помощью делеций 170 Предельная разрешающая способность рекомбинационного анализа 175 Уточнение генетической терминологии 175 Комплементационный анализ у высших эукариот 176 Рекомбинационный анализ тонкой структуры гена у высших эукариот: дрозофила 179 7 Геном вируса 190 Размножение бактериофагов 191 Мутантные бактериофаги 193 Комплементационный анализ условно летальных мутаций фага фХ174 195 Рекомбинационный анализ мутантов фага фХ174 197 Умеренный бактериофаг λ 204 Гены фага λ 205 Профаг λ 208 Сопоставление генетической и физической карт фага λ 211 Организация генома фагов Т2 и Т4 213 8 Бактериальный геном 227 Мутанты Е. coli 228 Генетические элементы Е. coli 230 F-фактор: генетический элемент, определяющий пол бактерий 231 Физическое картирование бактериальных генов методом прерванной конъюгации 236 Кольцевая форма генома Е. coli 238 F'-штаммы и частичные диплоиды 239 Подвижные генетические элементы (транспозоны) 241 Генетическое картирование Е. coli 246 Конъюгационное картирование 247 Трансдукционное картирование 249 Обзор результатов генетического анализа 255 9 Методы работы с ДНК 260 Кинетика ренатурации ДНК 261 Рестрикция ДНК и ферменты модификации 266 Рестрикционный анализ молекул ДНК 270 Определение последовательности нуклеотидов в ДНК (секвенирование) 273 Метод рекомбинантных ДНК 275 Векторы для клонирования ДНК 277 Библиотеки геномов 281 Обзор методов работы с ДНК 288
УВАЖАЕМЫЙ ЧИТАТЕЛЬ! Ваши замечания о содержании книги, ее оформлении, качестве перевода и другие просим присылать по адресу: 129820, Москва, И-110, ГСП, 1-й Рижский пер., д. 2, издательство «Мир» УЧЕБНОЕ ИЗДАНИЕ Дата добавления: 2015-12-16 | Просмотры: 1313 | Нарушение авторских прав |
9.3. Препарат линейной вирусной ДНК обрабатывают рестриктазой Sma I до полного расщепления. Электрофорез в геле выявляет присутствие фрагментов сле-
9.4. Препарат кольцевой плазмидной ДНК длиной 18 т. п. н подвергают полной рестрикции эндонуклеазой Kut I. Электрофорез в геле выявляет наличие фрагментов следующих размеров: 5,0; 4,0; 3,5; 3,0; 1,5 и 1,0. Неполная рестрикция интактной плазмидной ДНК той же эндонуклеазой с последующим разделением фрагментов посредством электрофореза в геле показывает существование пяти фрагментов, обозначенных в порядке убывания размеров буквами от А до Е. Результаты последующей полной рестрикции этих фрагментов представлены в таблице. Постройте рестрикционную карту кольцевой плазмидной ДНК.
Рис. 9.20. Карты сайтов рестрикции молекул ДНК из условия задачи 9.7.
1) Каковы два способа ориентации?
2) Совместная обработка рестриктазами Hin dIII и Hha Iдает фрагменты длиной 1 и 6,5 т. п.н. Какова ориентация клонируемого фрагмента?
9.8. Фрагмент ДНК длиной в 10 пар нуклеотидов был помечен с 3'-конца и последовательность нуклеотидов определялась способом, схематически изображенным на рис. 9.8. Результаты предста-
9.9. Расщепление ДНК фага λ рестриктазой Нin dIIIдает семь фрагментов (рис. 9.7). Продумайте постановку простого эксперимента с использованием полинуклеотидкиназы, позволяющего определить, какие из двух фрагментов содержат концевые точки ДНК λ.
9.10. Дано два препарата интактной ДНК фага λ: один дикого типа и второй λ dgal. Фаг λ dgal комплементирует мутанты по гену К, но не комплементирует мутанты по гену J (см. рис. 7.7). Сравните картину распределения Hin III-рестриктов, которую вы ожидаете получить при расщеплении ДНК λ dgal, с соответствую-
