Если в материале присутствуют споровые формы Bac.botulinum, то рост появляется только в прогретых пробирках. Если в материале присутствуют вегетативные формы, то рост появляется только в негретых пробирках.
II. Материал - рост на среде накопления.
Цель - получение О изолированной колонии.
Посевы на:
О
О
О
О
печеночный агар кровяной агар
+ 35°С, 48 часов в анаэростате или в эксикаторе.
III.
IV.
35°С, 24 часа.
Среда Китт-Тароцци
подвижность
С учетом анаэробности
Типы
Углеводолитическая активность
Протеолитическая активность
бацилл
гл
мл
сах
лакт
желатина
H2S
Т и п А
кг
кг
-
-
+
+
Тип В
кг
кг
кг
-
+
+
Тип С
кг
кг
-
+
+
Т и п Д
к
к
к
к
+
+
Тип Е
кг
кг
кг
-
+
+
Ускоренные методы:
1. Метод определения фагоцитарного показателя.
Сущность метода: Ботулинический токсин угнетает фагоцитарную активность лейкоцитов в 3-20 раз. К цитратной крови больного (в 3 пробирки) добавляют иммунные антитоксические сыворотки (А, В, Е). Выдерживают в термостате 30 минут и добавляют взвесь золотистого стафилококка. После 20 минут инкубации готовят мазки и определяют фагоцитарное число (количество кокков, поглощенных в среднем одним лейкоцитом).
Если в крови больного имеется токсин ботулизма (не инактивированный иммунной сывороткой), то ФЧ резко снижается.
Токсинообразование у бацилл ботулизма:
В анаэробных условиях вырабатывают токсин, устойчивый к температуре, свету, встряхиванию, концентрации солей. Разрушаются при кипячении 10-15 минут.
Протеолитические ферменты (пепсин, трипсин) не разрушают токсины типов. А, В, С, Д, F и усиливают активность типа Е. Это объясняется тем, что клостридии ботулизма типа Е вырабатывают в основном протоксин. Последний активируется панкреатином, трипсином.