Результаты изменений функциональных генов
1) Белок-репрессор «не подходит» к гену-оператору («ключ не входит в замочную скважину») - структурные гены работают постоянно (белки синтезируются все время).
2) Белок-репрессор плотно «присоединяется» к гену-оператору и не снимается индуктором («ключ не выходит из замочной скважины») - структурные гены постоянно не работают, и не синтезируются белки, закодированные в данном транскриптоне.
3) Нарушение чередования репрессии и индукции - при отсутствии индуктора специфический белок синтезируется, а при его наличии – не синтезируется. Вышеназванные нарушения работы транскриптонов связаны с мутациями гена-регулятора или гена-оператора.
Некоторые мутации не оказывают влияния на функцию соответствующего полипептида. Значительная часть генных мутаций нарушает функционирование гена и приводит к развитию генных болезней. Фенотипически генные мутации проявляются признаками нарушений метаболизма, частота которых в популяциях человека составляет 1-2% (фенилкетонурия, гемофилии, нейрофиброматоз, муковисцидоз, мышечная дистрофия Дюшенна-Беккера, гемоглобинопатия S). Они выявляются биохимическими методами и методами рекомбинантной ДНК.
По последствиям генные мутации классифицируют на нейтральные, регуляторные и динамические.
Нейтральная (молчащая) мутация - не имеет фенотипического выражения (например, замена нуклеотидов, не приводящая к замене аминокислоты в силу вырожденности генетического кода).
Регуляторная мутация - мутация в 5'- или З' - нетранслируемых областях гена; нарушает экспрессию гена.
Динамические мутации - обусловлены увеличением числа тринуклеотидных повторов в функционально значимых частях гена. Такие мутации могут привести к торможению или блокаде транскрипции, приобретению белковыми молекулами свойств, нарушающих их нормальный метаболизм.
ХРОМОСОМНЫЕ МУТАЦИИ
На хромосомном уровне организации наследственный материал обладает всеми характеристиками субстрата наследственности и изменчивости, в том числе способностью к приобретению изменений, которые могут передаваться новому поколению. Под влиянием различных воздействий физико-химическая и морфологическая структура хромосом может изменяться. Разрывы хромосом происходят закономерно в ходе кроссинговера, когда гомологичные хромосомы обмениваются соответствующими участками. Нарушение кроссинговера, при котором хромосомы обмениваются неравноценным генетическим материалом, приводит к появлению новых групп сцепления с изменением числа генов. При хромосомных мутациях последовательность нуклеотидов в генах обычно не меняется, но изменение числа или положения генов может привести к генетическому дисбалансу, что пагубно сказывается на нормальном развитии организма.
Хромосомные аберрации могут быть внутрихромосомными, межхромосомными и изохромосомными.
К внутрихромосомным относятся перестройки внутри одной хромосомы.
1) Делеции (нехватки) - выпадение части хромосомы (утрата сегмента ДНК размером от одного нуклеотида до целых генов) – может стать причиной нарушения эмбриогенеза и формирования множественных аномалий развития. Например, делеция участка короткого плеча 5-ой (5р-) хромосомы у человека приводит к развитию синдрома кошачьего крика (недоразвитие гортани, ВПР сердца, отставание умственного развития; у больных детей из-за аномалии гортани плач напоминает кошачье мяуканье). При делеции теломеров обоих плеч хромосомы часто наблюдается замыкание оставшейся структуры в кольцо - кольцевые хромосомы. При выпадении центромерного участка образуются децентрические хромосомы.
2) Дупликация - удвоение участка хромосомы. Результатом дупликации во второй хромосоме мухи дрозофилы может служить появление полосковидных глаз. Например, трисомия по короткому плечу хромосомы 9 приводит к появлению множественных ВПР, включая микроцефалию, задержку физического, психического и интеллектуального развития.
3) Инверсия - отрыв фрагмента хромосомы, поворот его на 180° и прикрепление к месту отрыва. При этом наблюдается нарушение порядка расположения генов.
4) Инсерция - вставка фрагментов ДНК размером от одного нуклеотида до целого гена.
5) Транспозиция - присоединение фрагмента к своей же хромосоме, но в другом месте.
Делеции и дупликации проявляются фенотипически всегда, так как изменяется набор генов и наблюдаются частичные моносомии (моносомии по части хромосомы) при нехватках и частичные трисомии - при дупликациях. Инверсии и транслокации фенотипически проявляются не всегда; они могут быть сбалансированными, когда не происходит ни увеличения, ни уменьшения генетического материала и сохраняется общий баланс генов в геноме. При инверсиях и транслокациях затрудняется конъюгация гомологичных хромосом, что может служить причиной нарушения при распределении генетического материала между дочерними клетками.
Межхромосомные перестройки происходят между негомологичными хромосомами.
Транслокация - это обмен сегментами между негомологичными хромосомами. Различают транслокации:
— реципрокные, когда две хромосомы обмениваются сегментами;
— нереципрокные, когда сегменты одной хромосомы переносятся в другую;
— робертсоновские, когда две акроцентрические хромосомы соединяются своими центромерными районами с потерей коротких плеч; в результате образуется одна метацентрическая хромосома.
Изохромосомные аберрации - образование одинаковых, но зеркальных фрагментов двух разных хромосом, содержащих одни и те же наборы генов. Это происходит в результате поперечного разрыва хроматид через центромеры (отсюда другое название - центрическое соединение).
Хромосомные аберрации выявляются цитогенетическими методами.
ГЕНОМНЫЕ МУТАЦИИ
Геномные мутации характеризуются изменением числа хромосом. Причиной геномных мутацийможет быть нарушение процессов, протекающих в мейозе. Нарушение расхождения бивалентов в анафазе приводит к появлению гамет с разным количеством хромосом (на каждую гамету с лишней хромосомой приходится другая - без одной хромосомы). Оплодотворение таких гамет нормальными половыми клетками приводит к изменению общего числа хромосом в кариотипе за счет уменьшения (моносомия) или увеличения (трисомия) числа отдельных хромосом.
Анеуплоидия - некратное гаплоидному уменьшение или увеличение числа хромосом (2n±1, 2n±2 и т. д.). Разновидности анеуплоидии: а) трисомия - три гомологичных хромосомы в кариотипе, например, при синдроме Дауна (трисомия по 21-й хромосоме), синдроме Эдвардса (трисомия по 18-й паре хромосом), синдроме Патау (трисомия по 13-й паре); б) моносомия - в наборе только одна из пары гомологичных хромосом. Единственная совместимая с жизнью моносомия у человека – по хромосоме Х – приводит к развитию синдрома Шерешевского-Тернера (45,Х0). Моносомии по первым крупным парам хромосом являются для человека летальными мутациями. Нулисомия - отсутствие пары хромосом (летальная мутация).
При повреждении механизма распределения гомологичных хромосом клетка остается неразделившейся, и образуются диплоидные гаметы. Оплодотворение таких гамет приводит к увеличению числа наборов хромосом.
Полиплоидия - увеличение числа наборов хромосом, кратное гаплоидному (Зn, 4n, 5n,...). Причины: двойное оплодотворение и отсутствие первого мейотического деления. Полиплоидия, как правило, используется в селекции растений и приводит к повышению урожайности. У млекопитающих и человека полиплоидия, а также большинство анеуплоидий, приводят к формированию леталей.
Гаплоидия (1n) - одинарный набор хромосом - например, у трутней пчел. Жизнеспособность гаплоидов снижается, так как в данном случае проявляются все рецессивные гены, содержащиеся в единственном числе. Для млекопитающих и человека - летальная мутация.
Геномные мутации обнаруживаются цитогенетическими методами. Они всегда проявляются фенотипически.
Патологические эффекты хромосомных и геномных мутаций проявляются на всех стадиях онтогенеза, поскольку вызывают нарушения:
• общего генетического баланса;
• скоординированности в работе генов;
• системности регуляции.
Они проявляются в двух взаимосвязанных вариантах:
• летальность;
• врожденные пороки развития.
Летальный исход хромосомных мутаций - один из главных факторов внутриутробной гибели, достаточно частой у человека. Многочисленные цитогенетические исследования материала спонтанных абортов, выкидышей и мертворожденных позволяют объективно судить об эффектах разных типов хромосомных аномалий во внутриутробном периоде индивидуального развития. Суммарный вклад хромосомных мутаций в число случаев внутриутробной гибели у человека составляет 45%. Среди перинатально погибших плодов частота хромосомных аномалий составляет 6%. В этих случаях летальные эффекты сочетаются с пороками развития, а точнее, реализуются через пороки.
Практически все хромосомные аномалии ведут к врожденным порокам развития. Более тяжелые их формы приводят к более раннему прерыванию беременности. Роль хромосомных и геномных мутаций не ограничивается только их влиянием на развитие патологических процессов в ранних периодах онтогенеза. Их эффекты прослеживаются в течение всей жизни.
В постнатальном периоде хромосомные мутации возникают в соматических клетках постоянно с невысокой частотой (около 2%). Такие клетки содержат специфические для них белки и в нормеэлиминируются иммунной системой, если они проявляют себя чужеродно. Однако в некоторых случаях хромосомные аномалии являются причиной злокачественного роста.
Облучение и химические мутагены, индуцирующие хромосомные аберрации, вызывают гибель клеток и, тем самым, способствуют развитию лучевой болезни, аплазии костного мозга. Имеются экспериментальные доказательства накопления клеток с хромосомными аберрациями в процессе старения.
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ КОНЦЕПЦИИ КАНЦЕРОГЕНЕЗА
В настоящее время установлено, что при канцерогенезе изменения происходят на молекулярно-генетическом уровне и затрагивают механизмы, отвечающие за размножение, рост и дифференцировку клеток. Хронологически можно выделить несколько теорий (концепций) канцерогенеза.
1. Мутационная концепция. Впервые Г. де Фриз (1901) высказал предположение о том, что опухоли - это результат мутаций соматических клеток. Т. Бовери (1914) считал, что в основе канцерогенеза лежат геномные или хромосомные мутации. В дальнейшем было показано, что процесс канцерогенеза может происходить без структурных изменений в геноме, а обнаруживаемые в опухолевых клетках хромосомные и геномные мутации являются следствием перерождения клеток.
2. Вирусо-генетическая концепция. Еще в 1911 г. Ф. Раус впервые показал, что вирусы являются причиной саркомы кур. Затем была установлена вирусная природа некоторых других опухолей (лейкозов у кур, мышей и крыс, бородавок у человека и кроликов). Л.А. Зильбер (1944-1968) считал вирусы универсальной причиной злокачественного роста. Мутагены и канцерогены стимулируют активность вирусов, их геном включается в ДНК клетки и изменяет ее свойства.
3. Эпигеномная концепция. Ю.М. Оленов (1967) и А.Ю. Броновицкий (1972) считали, что в основе превращения нормальной клетки в опухолевую лежат стойкие нарушения регуляции генной активности, т.е. повреждаются функциональные гены.
4. Концепция онкогена. Р. Хюбнер (1969) и Г.И. Абелев (1975) объединили вторую и третью концепции. ДНК клеток любого организма содержит определенные участки - протоонкогены. Протоонкогены организм получает от предков, или их вносят интегративные вирусы. Они длительное время могут находиться в неактивном (репрессированном) состоянии. Активирование протоонкогенов может вызвать их мутация, внесение в клетку промотора вируса и др. Они преобразуются в онкогены, которые детерминируют синтез трансформирующих белков, превращающих нормальную клетку в опухолевую.
УРОВНИ ПАТОГЕНЕЗА НАСЛЕДСТВЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
Основное звено патогенеза для многих наследственных заболеваний находится на клеточном уровне, где происходят патологические процессы, характерные для данной конкретной нозологической формы. Точкой приложения первичного действия мутантного гена являются отдельные структуры клетки, разные при различных болезнях: лизосомы, пероксисомы, мембраны, митохондрии.
На лизосомном уровне развертываются патогенетические процессыпри болезнях накопления в связи с нарушением активности лизосомных ферментов. Так, накопление в клетках, а затем и в основном межклеточном веществе, гликозаминогликанов (мукополисахаридов) приводит к развитию тяжелых заболеваний - мукополисахаридозов. Причина избыточного содержания этих полимеров - отсутствие их деградации в лизосомах, что связано с дефектами в группе специфических ферментов, катализирующих весь цикл деградации.
Если точкой приложения действия мутантного гена становятся пероксисомы, то развиваются пероксисомные болезни. Клинически эти заболевания проявляются в виде множественных врожденных пороков развития, в целом сходных при разных нозологических формах (множественные черепно-лицевые дисморфии, катаракта, почечные кисты и другие проявления).
Клеточные мембраны тоже могут быть ключевыми элементами патогенеза генных болезней. Так, отсутствие специфических белковых молекул-рецепторов на клеточной поверхности, связывающих липопротеиды низкой плотности, приводит к семейной гиперхолестеринемии
Клеточный уровень патогенеза генных болезней может проявляться не только в конкретных органеллах, но и в виде нарушений скоординированности деятельности клетки. Например, мутации, затрагивающие области онкогенов, ведут к снятию контроля размножения клеток и, соответственно, к злокачественному росту.
На органном уровне при различных болезнях мишенью патологического процесса служат различные органы. Поражение их может быть первичным или вторичным:
• отложение меди в печени и экстрапирамидной системе мозга при гепатолентикулярной дегенерации (болезнь Вильсона-Коновалова) - первичный процесс;
• гемосидероз паренхиматозных органов при первичном гемохроматозе или талассемии развивается вторично вследствие усиленного распада эритроцитов.
КЛАССИФИКАЦИЯ НАСЛЕДСТВЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
1. По виду клеток, в которых произошли мутации: а) гаметические; б) соматические.
2. По клиническим проявлениям: а) предрасположение к болезни; б) собственно болезни; в) особые формы болезни – уродства.
3. По виду наследственности и аномального гена: а) доминантные; б) рецессивные; в) полудоминантные.
4. Наиболее практичной является классификация в зависимости от уровня организации наследственного материала: а) генные; б) хромосомные.
В зависимости от вида первично поражённых клеток выделены следующие группы заболеваний:
• болезни вследствие мутаций в половых клетках - «гаметические», т.е. собственно наследственные болезни (например, фенилкетонурия, гемофилии);
• болезни вследствие мутаций в соматических клетках - «соматические» (например, опухоли, некоторые болезни иммунной аутоагрессии); эти заболевания не передаются по наследству;
• болезни вследствие комбинации мутаций в половых и соматических клетках (например, семейная ретинобластома).
Отдельно рассматривают летальные, сублетальные и гипогенитальные заболевания:
• летальные болезни – приводят к гибели во время внутриутробного развития (например, моносомии по аутосомам, гаплоидии, большинство полиплоидии);
• сублетальные заболевания – приводят к гибели индивида до периода полового созревания (например, наследственные иммунодефициты типа агаммаглобулинемии швейцарского типа, синдром Луи-Бар, некоторые гемофилии);
• гипогенитальные заболевания – сочетаются с бесплодием (например, синдромы Шерешевского-Тернера, Кляйнфельтера).
Деление наследственных болезней на генные и хромосомные неформальное: генные мутации передаются из поколения в поколение в соответствии с законами Менделя, в то время как хромосомные болезни, обусловленные анэуплоидиями, вообще не наследуются (летальный эффект с генетической точки зрения), а структурные перестройки (инверсии, транслокации) передаются с дополнительными перекомбинациями.
В основу генетической классификации наследственной патологии положен этиологический принцип - тип мутации и характер взаимодействия наследственных факторов со средой.
Генетические болезни соматических клеток выделены в самостоятельную группу после обнаружения в клетках при злокачественных новообразованиях специфических хромосомных перестроек, вызывающих активацию онкогенов. Эти изменения в генетическом материале клеток являются этиопатогенетическими для злокачественного роста и поэтому могут быть отнесены к категории генетической патологии.
Болезни, возникающие при несовместимости матери и плода по антигенам, развиваются в результате иммунной реакции матери на антигены плода. В целом эта группа составляет значительную часть патологии и довольно часто встречается в медицинской практике. Наиболее типичное и хорошо изученное заболевание этой группы - гемолитическая болезнь новорожденных, возникающая в результате несовместимости матери и плода по резус-антигену. Болезнь возникает в тех случаях, когда мать имеет резус-отрицательную группу крови, а плод унаследовал резус-положительный аллель от отца.
Клиническая классификация наследственных болезней ничем не отличается от классификации ненаследственных болезней по органному, системному признаку или по типу поражения обмена веществ.
Поскольку наследственные болезни едины по этиологическому принципу (мутации), основу их классификации составляет, прежде всего, системный и органный принцип: нервные; нервно-мышечные; кожные; глазные; опорно-двигательного аппарата; эндокринные; крови; легких; сердечно-сосудистой системы; мочеполовой системы; желудочно-кишечного тракта. Такой подход неоднозначен. Можно найти очень немного наследственных болезней, при которых избирательно поражается одна система. Большинство генных мутаций, а тем более хромосомные и геномные, вызывают генерализованное повреждение какой-либо ткани или захватывают несколько органов. Поэтому многие наследственные болезни проявляются в виде синдромов или комплекса патологических признаков.
Несмотря на очевидную условность, клиническая классификация помогает врачу соответствующего профиля концентрировать внимание на наследственных болезнях, встречающихся в практике данной специальности.
Патогенетическая классификация основана на выделении основного патогенетического звена.
Биохимическая классификация наследственных болезней, проявляющихся в нарушении обмена веществ, объединяет генетически й и клинический подход и проводится по типу повреждения первичного звена обмена.
В зависимости от характера нарушения обмена веществ различают:
· Наследственные дефекты обмена углеводов.
Галактоземия, нарушение метаболизма лактозы, мукополисахаридозы, нарушение расщепления полисахаридов.
· Дефекты обмена липидов и липопротеидов.
Сфинголипидозы - нарушения расщепления структурных липидов и другие формы нарушения обмена липидов.
· Дефекты обмена аминокислот.
Фенилкетонурия, альбинизм - нарушение синтеза пигмента меланина из тирозина и др.
· Дефекты обмена витаминов.
Гомоцистинурия - развивается как результат генетического дефекта кофермента витаминов группы В.
· Дефекты обмена пуриновых и пиримидиновых оснований.
· Дефекты биосинтеза гормонов.
Адреногенитальный синдром, тестикулярная феминизация.
· Наследственные дефекты ферментов эритроцитов.
· Коллагеновые болезни – дефекты биосинтеза и распада коллагена - структурного компонента соединительной ткани.
Болезнь Эллерса-Данло, болезнь Марфана и ряд других заболеваний.
Болезни, вызванные дефектами генов, кодирующих ферменты, наследуются по аутосомно-рецессивному типу, а вызванные генами, кодирующими модуляторные белковые функции или рецепторы, - по аутосомно-доминантному или аутосомно-рецессивному. Болезни, вызванные генами транскрипционных факторов, относятся к группе аутосомно-доминантных. В геноме человека данное правило иногда нарушается, что обусловлено различными мутациями в одном и том же гене. Это необходимо учитывать при медико-генетическом консультировании.
В основе болезней, патогенез которых приводит к аномалиям морфогенеза, лежит нарушение дифференцировки клеток, приводящее к врожденным порокам развития (полидактилия, синдромы Хол-Орама, Крузона и др.).
Однако подавляющее большинство моногенных наследственных болезней относится к третьей группе - обусловленных комбинацией нарушения обмена веществ и аномалий морфогенеза (муковисцидозы, ахондроплазии, мышечные дистрофии и др.).
Формирование наследственных болезней во времени также имеет закономерности, связанные с функцией первичного продукта гена:
• болезни транскрипционных факторов развиваются внутриутробно;
• патология ферментов - в течение первого года жизни;
• рецепторов - в возрасте от 1 года до пубертатного периода;
• модулярной белковой функции - в период до 50 лет.
ВИДЫ И ЗАКОНОМЕРНОСТИ ТЕЧЕНИЯ ГЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
В широко известном научному и медицинскому сообществу и ежедневно пополняемом Каталоге наследственных заболеваний человека (OMIM, Online Mendelian Inheritance in Man <http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Omim/>) по состоянию на август 2001 г. перечислено не менее 4200 моногенных болезней, вызываемых мутациями конкретного гена. Общая частота генных болезней в популяциях людей составляет 2-4%. Для значительного числа поражённых генов идентифицированы разные аллели, количество которых для некоторых моногенных болезней достигает десятков и сотен. Врачу важно знать, что такой полиморфизм поражённого гена может привести и часто приводит к разным клиническим фенотипам в рамках одной моногенной болезни.
Генные болезни - разнообразная по клиническим проявлениям группа наследственных заболеваний, обусловленных мутациями на генном уровне. Основой для объединения их в одну группу служат этиологическая генетическая характеристика и закономерности наследования в семьях и популяциях. Согласно многочисленным исследованиям разных наследственных болезней и генома человека в целом, можно говорить о многообразии видов мутаций в одном и том же гене. Любой из этих видов мутаций может вести к наследственным болезням. Даже одна и та же генная болезнь может быть обусловлена разными мутациями.
При изучении белковых продуктов мутантных генов выделяют две группы мутаций. Первая группа связана с качественными изменениями белковых молекул, т.е. наличием у больных аномальных белков (например, аномальные гемоглобины), что обусловлено мутациями структурных генов. Другая группа заболеваний характеризуется количественными изменениями содержания нормального белка в клетке (повышение или снижение), что обусловлено, чаще всего, мутациями функциональных генов, т.е. связано с нарушениями регуляции работы генов.
Мутации, вызывающие наследственные болезни, могут затрагивать структурные, транспортные, эмбриональные белки, ферменты. Наследственные аномалии могут возникать на всех уровнях регуляции синтеза белков, обусловленных соответствующими ферментативными реакциями:
• претранскрипционном (осуществляется путем увеличения или уменьшения числа копий гена);
• траскрипционном (генетические дефекты в спейсерах, интронах, транспозонах, регуляторных белках могут приводить к нарушению транскрипции всего гена, обусловливающие изменение объема синтеза соответствующего белка);
• процессинга и сплайсинга про-и-РНК (нарушения на уровне разрушения неинформативных участков про-и-РНК и сплавления информативных участков);
• трансляционном (нарушения на уровне непосредственной сборки белковой молекулы в рибосоме);
• посттрансляционном (нарушения на уровне образования вторичной, третичной и четвертичной структуры белковой молекулы).
Поскольку мутации в индивидуальных генах являются этиологическим фактором генных болезней, то закономерности их наследования соответствуют менделевским правилам расщепления в потомстве.
При рассмотрении генных болезней как менделирующих признаков организма считается, что речь идет о так называемых полных формах, то есть формах, обусловленных гаметическими мутациями. Это могут быть новые или унаследованные от предыдущих поколений мутации. Следовательно, в этих случаях патологические гены присутствуют во всех клетках организма.
Однако теоретически можно представить появление и мозаичных форм. Любые мутации, в том числе генные, могут возникать на ранних стадиях дробления зиготы в одной из клеток, и тогда индивид будет мозаичен по данному гену. В одних клетках у него будет функционировать нормальный аллель, в других - мутантный или патологический.
В случае генных болезней клиническая картина заболевания может сформироваться вследствие патогенетических эффектов мутаций разных генов, то есть сходное фенотипическое проявление болезни может быть обусловлено несколькими различными мутациями. Следовательно, в одну группу попадут разные с генетической точки зрения случаи (мутации в разных локусах или разные мутации в одном локусе) – генокопии. Вместе с этим, хотя и редко, могут встречаться фенокопии генных болезней - случаи, при которых повреждающие внешние факторы, действующие, как правило, внутриутробно, вызывают болезнь, по клинической картине в общих чертах сходную с наследственной. Противоположное состояние, когда при мутантном генотипе в результате средовых воздействий (лекарства, диета и т. д.) болезнь не развивается, называют нормокопированием.
Понятия о гено- и фенокопиях дают врачу следующие возможности: поставить правильный диагноз; более точно определить прогноз состояния здоровья больного или вероятность рождения больного ребенка; в конкретном случае предупредить развитие болезни у ребенка, унаследовавшего патологический ген.
В соответствии с генетическим принципом классификации генные болезни делят на группы по типам наследования
· аутосомно-доминантные;
· аутосомно-рецессивные;
· Х-сцепленные доминантные;
· Х-сцепленные рецессивные;
· Y-сцепленные (голандрические) и митохондриальные.
Отнесение болезни к той или иной группе позволяет врачу сориентироваться относительно ситуации в семье и определить вид медико-генетической помощи.
Дата добавления: 2014-11-24 | Просмотры: 1780 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 |
|