Феномен иммунофлюоресценции
Объединяет большую группу методов и реакций, основанных на использовании свечения в люминисцентном микроскопе антител, меченых флюорохромом.
Непрямой метод.
РИФП - реакция иммобилизация прямая.
Для проведения реакции необходимо иметь:
1. Предметные стекла.
2. Иммунные сыворотки, меченые флюорохромом.
3. Антиглобулиновые сыворотки, меченые флюорохромом.
4. Исследуемый материал (микробы, культуры и пр.).
5. Растворитель - 0,85 % раствор хлорида натрия.
На обезжиренное предметное стекло делают мазки исследуемого материала или мазки-отпечатки. Препараты подсушивают, фиксируют смесью Никифорова. На мазок наносят иммунную сыворотку, специфичную в отношении предполагаемого в материале микроба, меченую флюорохромом. Препарат ставят во влажную камеру на 30 мин при 37о С, а затем промывают в растворителе и ополаскивают в дистиллированной воде 10 мин, сушат при 18-20О С и исследуют в люминисцентном микроскопе с иммерсионной системой.
Если микробы в мазке есть, то вокруг них будут скопления зеленого специфического свечения, а фон может равномерно слабо светиться. Это меченые антитела окружили гомологичную клетку. Оценку интенсивности специфического свечения ведут по 4-кресной системе: ++++ или +++ яркая флюоресценция, ++ и + слабая флюоресценция клеток.
Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 513 | Нарушение авторских прав
|