АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Лабораторная диагностика дисбиоза и ее интерпретация

В связи с тем, что ключевая роль в развитии дисбиозов кишечника принадлежит микробному фактору, представляющему собой сложную мультикомпонентную систему, обладающую множеством различных свойств, посредством реализации которых она оказывает значимое влияние на состояние организма хозяина, большую важность приобретает своевременное и правильное проведение бактериологической оценки микробного статуса кишечника у пациента.

Обязательно всестороннее обследование пищеварительного тракта, в том числе желудка, поджелудочной железы, гепатобилиарной системы, тонкой и толстой кишки. С применением контрастной рентгенографии желудка и двенадцатиперстной кишки, ирригоскопии, эндоскопического исследования.

Копрологическое исследование

Для оценки переваривания и всасывания жиров, белков и углеводов широко используют копрограмму.

1. Копрологическое исследование.

При дисбиозе, сопровождающемся бродильной диспепсией, количество кала значительно увеличено, характер стула – кашицеобразный, пенистый, реакция – резко кислая; в кале определяются мышечные волокна и жирные кислоты, увеличено количество выделяемых органических кислот. Реакция на крахмал, непереваренную клетчатку и иодофильную флору резко положительные.

При дисбиозе, сопровождающемся гнилостной диспепсией, количество кала увеличено, отмечается его щелочная реакция, резкий гнилостный запах, характер стула жидкий, много мышечных волокон и соединительной ткани. Реакция на крахмал, непереваренную клетчатку, йодофильную флору и слизь положительные. Резко увеличено количество выделяемого аммиака

(10–14 усл.ед.)

При дисбиозах, клинически проявляющихся воспалением слизистой оболочки кишечника и сопровождающихся запорами, количество кала уменьшено, характер – в виде «овечьего кала», реакция – щелочная, определяется слизь, много лейкоцитов, клеток кишечного эпителия.

2. Биохимическое исследование кишечного содержимого.

В фекалиях при дисбиозах отмечается увеличение ферментативной активности, связанной с изменением обменных процессов в энтероцитах и метаболизмом микрофлоры. Характерно появление в кале ферментов щелочной фосфатазы и энтерокиназы, которые у здоровых детей в норме инактивируются в толстой кишке.

Одновременно регистрируются изменения содержания углеводов: увеличивается количество фруктозы, а при пролиферативном росте в кишечнике лактозоотрицательной кишечной палочки и симптомах вторичной дисахаридной недостаточности – количество лактозы.

Газово-жидкостная хроматография фекалий при дисбиозе выявляет нарушение в звене анаэробной микрофлоры, регистрирующееся пиками летучих жирных кислот. С помощью газовой хроматографии можно выявить дисбиоз по изменениям количества ароматических веществ в фекалиях: индола, фенола, крезола и скатола.

Несмотря на исключительно высокую эффективность хроматографических методов исследования, они, тем не менее не получили широкого распространения в клинической практике из-за ограниченной доступности. В связи с этим был разработан и апробирован более простой тест, определяющий протеолитическую активность фекалий

(казеиноволитический тест) у больных с дисбозами. Проведенные исследования показали исключительно высокую прямую корреляцию протеолитической активности фекалий со степенью дисбиоза.

3. Бактериологическое исследование соскоба со слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки при эндоскопическом исследовании, прямой кишки при ректороманоскопии, колоноскопии, а также кишечного содержимого и желчи.

Бактериологическое исследование соскоба слизистой оболочки двенадцатиперстной или проксимальной части тощей кишки, а также смывов с данных отделов методом еюноперфузии возможно только при эндоскопическом исследовании желудка и тощей кишки. Анализ позволяет выявить дисбиоз проксимальных отделов кишечника. Показателями являются увеличение степени микробной обсемененности свыше 10⁴ КОЕ/г или мл (при биопсии слизистой) и редукция лактобацилл.

Бактериологическое исследование соскоба со слизистой оболочки толстой или прямой кишки, выполняемое при колоноскопии или ректороманоскопии, позволяет оценить пристеночную микрофлору кишечника.

4. Анализ кала на дисбиоз

Для проведения бактериологического анализа кала на дисбиоз забор фекалий производится в стерильную посуду без консервантов стерильным инструментом. Срок доставки материала в лабораторию с момента его забора – не более 2 часов. При невозможности доставки материала в указанный срок, допустимо его хранение в холодильнике при 4 градусах не более 6 часов. Бактериологическое исследование позволяет обнаружить достаточно широкий спектр условно-патогенных микроорганизмов и изменения их свойств, снижение уровня нормальных симбионтов

(бифидобактерий, лактобактерий и др.).

Дисбиоз диагностируется по следующим микробиологическим критериям:

- снижение содержания бифидобактерий менее 10⁸ КОЕ/г фекалий (у детей до 3 лет - менее 10⁹);

- снижение содержания лактобацилл менее 10⁶ КОЕ/г (у детей до 3 лет менее 10⁷);

- увеличение содержания эшерихий более 10⁸ КОЕ/г (у детей первого полугодия жизни более 10⁹);

- снижение содержания эшерихий менее 10⁶ КОЕ/г;

- появление эшерихий с измененными свойствами (лактозоотрицательных форм кишечной палочки или кишечной палочки с измененными ферментативными свойствами: слабоферментирующих лактозу или аминокислоты, продуцирующих сероводород и др.) в количестве более 10% от общего числа;

- обнаружение энтерококков в количестве более 10⁶ КОЕ/г (у детей первого полугодия жизни более 10⁸ КОЕ/г);

- появление гемолитической микрофлоры;

- возможно выделение патогенных бактерий (сальмонелл, шигелл, патогенных сероваров кишечной палочки), являющихся экзогенным этиологическим фактором ОКИ;

- обнаружение условнопатогенных грамотрицательных палочек (представителей рода Proteus, Klebsiella, Citrobacter, Pseudomonas и др.);

- обнаружение грибов рода Candida;

- обнаружение золотистых стафилококков;

- обнаружение клостридий более 10³ КОЕ/г.

В зависимости от степени выраженности микроэкологических нарушений в кишечнике возможны различные сочетания отдельных представителей микробиоценоза, характеризующие дисбиотические изменения:

- нарастание количества условно-патогенных микроорганизмов одного или нескольких видов в кишечнике при нормальном количестве бифидобактерий;

- нарастание одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при умеренном снижении количества бифидобактерий (на 1–2 порядка);

- снижение содержания облигатных представителей нормобиоценоза

(бифидобактерий и/или лактобацилл) без регистрируемого увеличения количества сапрофитной или условно-патогенной микрофлоры кишечника;

- умеренное или значительное (менее10⁷) снижение содержания бифидобактерий, сочетающееся с выраженными изменениями в аэробной микрофлоре – редукцией лактобацилл, появлением измененных форм кишечной палочки, обнаружением одного или нескольких представителей условно-патогенных микроорганизмов в высоких титрах (до 10⁷–10⁸ КОЕ/г), появлением патогенных бактерий.

5. Дыхательный тест. 14С – ксилозный дыхательный тест имеет 90% чувствительность и специфичность. Положительный тест регистрируется при избыточном росте микрофлоры и ее появлении в тонкой кишке;

Большинство практических руководств по диагностике дисбозов упоминают новые методы, позволяющие более полно оценивать микробный спектр кишечника в целом. К ним относят:

- биохимический экспресс-метод определения протеолитической активности супернатантов фекалий;

- высоковольтный электрофорез на бумаге с целью обнаружения b-аспартилглицина, b-аспартиллизина, b-аланина, 5-аминовалериановой и гамма-аминомасляной кислот и др.;

- ионная хроматография (определение биогенных аминов, желчных и карбоновых кислот, ароматических соединений);

- газожидкостная хроматография (обнаружение в фекалиях летучих жирных кислот – уксусной, валериановой, капроновой, изомасляной и др.);

- исследование микрофлоры в биоптате тощей кишки, полученном в ходе эндоскопического исследования.

Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 828 | Нарушение авторских прав