Лабораторные исследования ликвора
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №1.
Спинномозговую жидкость доставляют в стерильных пробирках с указанием даты получения материала, фамилии, имени и отчества, возраста больного, номера истории болезни; палаты, названия отделения, цели исследования, предполагаемого диагноза; особо указывают, откуда был получен материал и регистрируют его. Так как при продолжительном хранении жидкости при комнатной температуре происходит разрушение форменных элементов, ее рекомендуют исследовать как можно быстрее. При температуре 4°С ее можно хранить до 2 сут. При бактериоскопическом исследовании на менингококки жидкость следует предохранять от охлаждения, так как при низкой температуре менингококки могут погибнуть. Для обнаружения микобактерий туберкулеза пробирки с материалом доставляют не встряхивая и помещают на 18—24 ч в строго вертикальном положении в холодильник. Клинический анализ предполагает изучение физических свойств, проведение микроскопического, химического и бактериоско- пического исследования. Для наиболее полного исследования необходимо 7—10 мл спинномозговой жидкости. Результаты исследования оформляют в бланке анализа.
Общие физические свойства ликвора.
Количество извлеченного ликвора зависит от цели пункции и состояния больного. Для обычного исследования берут 8-10 мл, у детей 5-7 мл, у грудных детей 2-3 мл ликвора.
Цвет ликвора.
Нормальный ликвор – бесцветная, прозрачная жидкость, макроскопически трудно отличимая от дистиллированной воды.
Ксантохромия – кофейно-желтый цвет ликовра. Его дают продукты распада гемоглобина, освобожденные из лизированных эритроцитов.
В зависимости от механизма возникновения ксантохромии различают:
а) застойную – появляется вследствие застоя крови в мозговых сосудах и изменений проницаемости стенок сосудов. Эта ксантохромия сопровождается значительным увеличением белков в ликворе;
б) геморрагическую – развивается при попадании крови в ликворное пространство. В таких случаях должно пройти определенное время до появления ксантохромии. Через 2-12 часов выявляется оранжевая ксантохромия, через 2-4 часа – желтая;
Ксантохромия может быть также при желтухах (в т.ч. и у новорожденных) и при субарахноидальном введении пенициллина.
Эритрохромия или эритроцитрахия (кровавый ликвор). Различают:
а) артефактную – эритроциты попадают в ликвор во время пункции; при этом первая порция кровавая, а остальные нет;
б) истинную – вызываемую кровоизлияниями в ликворную систему при инсульте, опухолях, травмах. При этом все порции ликвора одинаково окрашены.
Зеленовато-желтый цвет ликвора может быть при гнойных менингитах и абсцессах мозга.
Прозрачность.
В норме ликвор прозрачен. Помутнение ликвора от легкой опалесценции до выраженной мутности наблюдается при резком увеличении содержания клеточных элементов (эритроциты, лейкоциты, микроорганизмы) и повышенном содержании общего белка.
Мутность, обусловленная форменными элементами крови, после центрифугирования исчезает.
Степень мутности выражается в 4-х крестной системе:
легкая опалесценция +;
легкое помутнение ++;
мутность +++;
хлопья мути ++++.
Относительная плотность.
Измеряется ареометром малого размера.
Нормы:
для люмбального ликвора – 1,005-1,009
для субокципитального – 1,003-1,007
для вентрикулярного – 1,002-1,004
Относительная плотность повышается при менингитах, уремии, диабете, черепно-мозговых травмах.
Фибриновая сетка.
При воспалении мозговых оболочек вследствие значительного увеличения количества грубодисперсных белков (глобулинов и фибриногена) на поверхности ликвора, если его отстоять, образуется нежная паутинообразная фибриновая сеточка. Она является важным диагностическим признаком. Наблюдается у больных с гнойным менингитом, туберкулезным менингитом, опухолями ЦНС, мозговой геморрагией, компрессией и др.
Запах определяют органолептически.
Реакцию устанавливают с помощью универсальной индикаторной бумаги.
Для исследования ликвора можно использовать диагностические и реагентные тест-полоски. Правила использования реагентных тест-полосок для исследования ликвора аналогичны правилам исследования мочи.
Капля исследуемого ликвора наносится на соответствующую реактивную сенсорную зону с помощью пипетки. Ликвор сразу пропитывает сенсорный элемент, окраска которого изменяется в зависимости от концентрации вещества. Результат исследования заносится в бланк.
Подсчет клеточных элементов.
Количество клеток (цитоз) подсчитывают тотчас после получения жидкости, используя камеру Фукса—Розенталя. Клеточные элементы предварительно окрашивают раствором Самсона: 30 мл ледяной уксусной кислоты, 2 мл насыщенного раствора фенола, 2 мл спиртового раствора фуксина 1:10, дистиллированной воды до 100 мл. Вращением пробирки между ладонями в течение 2—3 мин смешивают исследуемую жидкость. Затем в чистую и сухую пробирку помещают ее и раствор Самсона в соотношении 10:1, после чего жидкость и краску перемешивают и оставляют на 10—15 мин. Смесь набирают пипеткой с баллоном и заполняют ею заранее подготовленную камеру Фукса — Розенталя.
Подсчет форменных элементов производят при опущенном конденсоре микроскопа, окуляр 7Х, объектив 40Х. Клеточные элементы сосчитывают на всей площади сетки камеры. Рекомендуется сосчитать две камеры и вывести среднее арифметическое. При использовании камеры Фукса — Розенталя (площадь сетки 16 мм2, глубина 0,2 мм,- объем 3,2 мкл, разведение 11:10) число элементов в 1 л рассчитывают по формуле:
При работе с небольшими объемами материала пипеткой отмеривают 10 капель исследуемой жидкости и каплю краски, смешивают их на стекле, а затем заполняют камеру. При значительном содержании клеток — плеоцитозе (более 200 на площади сетки) — сосчитывают половину сетки камеры Фукса — Розенталя; полученный результат удваивают и рассчитывают как обычно. При плеоцитозе более тысячи подсчитывают первый ряд больших квадратов сетки и полученный результат умножают на 4.
Собственный цитоз геморрагической жидкости определяют следующим образом. Исследуемый материал набирают в 2 пробирки, в 1-ю—с изотоническим раствором хлорида натрия для подсчета эритроцитов, во 2-ю — с краской для подсчета лейкоцитов. После смешивания содержимого пробирок последовательно сначала из 1-й, а затем из 2-й пробирки заполняют 2 камеры и подсчитывают раздельно количество эритроцитов и лейкоцитов. Рассчитывают долю лейкоцитов за счет примеси крови, исходя из того что 1 лейкоцит приходится на 1000 эритроцитов. Затем высчитывают собственный цитоз, отняв от числа лейкоцитов в 1 л рассчитанную долю за счет примеси крови.
Пример расчета. Подсчитано 150 000- 106/л эритроцитов и 1000 • 106/л лейкоцитов. Если на 1000 эритроцитов приходится 1 лейкоцит, то на 150 000- 106 их приходится х. Отсюда
150 000 * 106 * 1,.
х =--------------------- = 150*106 /л леикоцитов. Собственный цитоз
равен 1000*106 — 150*106 = 850*106 лейкоцитов в 1 л спинномозговой жидкости.
Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 1441 | Нарушение авторских прав
|