Препаратов клеточных включений»
Цель: изучение клеточных включений на примере готовых и временных препаратов.
Материалы и оборудование:
- световой микроскоп;
- предметные и покровные стекла;
- препаровальные иглы;
- скальпель;
- картофель;
- наружные сухие пленчатые чешуи луковицы репчатого лука;
- дистиллированная вода;
- глицерин;
- пипетки;
- готовые препараты: жировые включения в клетках печени; включения гликогена в клетках печени; желточные включения; гранулы зимогена в секреторных клетках; пигментные клетки-хроматофоры.
Ход работы
1 Изучить различные клеточные включения на примере готовых препаратов
Препарат 1 Жировые включения в клетках печени аксолотля
При малом увеличении видны прилежащие друг к другу клетки многоугольной и округлой формы. При обработке ткани четырехокисью осмия видно, что в цитоплазме гепатоцитов локализуются черные (адсорбировавшие осмий) жировые капли.
Надо изучить при большом увеличении группу печеночных клеток с отчетливо видимыми жировыми включениями (рис.9). Гепатоциты разделены клеточными границами (1). Клетки имеют круглые структурированные ядра (2). Цитоплазма (3) имеет желтовато-зеленоватый оттенок, в ней находятся в виде капель черные жировые включения (4).
Первоначально синтезированный жир откладывается в печеночных клетках в виде мельчайших капель, которые, сливаясь между собой, образуют капли большего размера. Каждая жировая капля окружена мембраной, образованной при участии комплекса Гольджи.
Препарат 2 Включения гликогена в клетках печени аксолотля
При малом увеличении в цитоплазме гепатоцитов видны включения гликогена, окрашенные в красно-фиолетовый цвет (рис.10). Надо выбрать группу клеток с хорошо заметными границами и изучить форму и распределение этих включений при большом увеличении. В неокрашенной цитоплазме гепатоцитов находится большое количество гликогена в виде глыбок (1) различной величины и формы, заполняющих почти всю клетку. Структурированные ядра (2) клеток заметны по фиолетовой окраске. Встречаются гепатоциты, в которых гликоген в виде крупных глыбок скапливается на одной стороне клетки (3): это артефакт, связанный с проникновением фиксатора в клетку.
В цитоплазме гепатоцитов, относительно свободной от гликогена, видны пустые, неокрашенные вакуоли (4), которые представляют собой полости, оставшиеся на месте жировых включений.
Препарат 3 Желточные включения
При малом увеличении виден зародыш лягушкинаранней стадии развития – дробления оплодотворенной яйцеклетки. Почти вся цитоплазма бластомера (рис. 11) заполнена желточными включениями (1) – гранулами желтого цвета, палочковидной, округлой или овальной формы. Желточные включения образованы протеинами, фосфолипидами и углеводами.
Помимо желточных гранул, в цитоплазме бластомеров встречаются мелкие буровато-коричневые пигментные включения (2), которые представляют собой защитное приспособление от сильного воздействия световых лучей.
Препарат 4 Гранулы зимогена в секреторных клетках
поджелудочной железы крысы
При малом увеличении надо найти секреторные отделы железы округлой или овальной формы, образованные одним слоем железистых клеток. В клетках и в просвете этих образований видны окрашенные в черный цвет гранулы зимогена (рис.12). При большом увеличении надо изучить конические железистые клетки (1), в апикальных отделах (2) которых находятся гранулы зимогена (3). Базальная зона (4) выглядит гомогенной. На границе базальной и апикальной зон находится относительно крупное ядро (5) с ядрышком (6) и глыбками хроматина (7).
На различных участках препарата видно, что соотношение базальной и апикальной зон меняется в зависимости от физиологического состояния клетки: перед выделением секрета гранулы зимогена сосредоточиваются у апикального конца клетки, а ядро оттесняется ближе к базальной мембране; после выделения секрета зимогенная зона уменьшается, изменяется также и положение ядра.
Препарат 5 Пигментные клетки-хроматофоры.
Кожа головастика
При малом увеличении видно, что неокрашенные элементы кожи головастика представляют как бы фон, на котором выделяются крупные пигментные клетки с отростками – меланофоры (хроматофоры).
При большом увеличении (рис. 13) в цитоплазме можно увидеть значительное количество глыбок меланина (1), которые могут маскировать ядра (2) этих клеток. Отростки (3) меланофоров способны изменять длину, вследствие чего меняется количество пигментных включений на единицу объема цитоплазмы и интенсивность окраски этих клеток, а, следовательно, и цвет кожи животного.
Рисунок 13 – Пигментные клетки – хроматофоры [9]
2 Приготовить временный препарат крахмальных зерен в клубнях картофеля
Для приготовления препарата нужно разрезать клубень. Небольшое количество выступившей на поверхности разреза мутной белой жидкости скальпелем или препаровальной иглой перенести на предметное стекло в каплю воды и накрыть покровным стеклом.
При малом и большом увеличениях микроскопа обычно хорошо видны многочисленные зерна, размеры и очертания которых очень варьируют (рис. 14). При широко открытой диафрагме они выглядят почти прозрачными, при несколько закрытой диафрагме контуры зерна и его структура видны более резко.
Центры образования (3) крахмальных зерен имеют вид сильно преломляющих свет блестящих точек, вокруг которых располагаются слои крахмала (2) различной ширины. Четкая граница между отдельными слоями крахмала обусловлена различиями в показателях преломления света между внутренней и наружной зонами двух соседних слоев. Снаружи крахмальные зерна окружены оболочками пластид (1).
Большинство зерен имеет по одному центру образования – это простые зерна (4). В препарате можно увидеть зерна с двумя и большим (до пяти) числом центров образования, каждый из которых окружен собственными крахмальными слоями. Такие зерна называют сложными (5). Часто в них видна трещина, по которой может произойти разделение зерен. Если вокруг каждого из формирующихся в лейкопласте зерен затем возникают общие слои, окружающие эти зерна, то образуется полусложное зерно (6).
3 Приготовить препарат кристаллов оксалата кальция в клетках наружных чешуй луковицы репчатого лука
Большое количество оксалата кальция находится в сухих пленчатых чешуях, окружающих снаружи луковицу. Снятые с луковицы мелко нарезанные чешуи длительное время выдерживают в глицерине. Для рассмотрения кристаллов кусочки этих чешуй переносят в глицерин на предметное стекло и накрывают покровным стеклом.
Чешуя состоит из нескольких слоев клеток, форма, размеры и ориентация которых в каждом слое сильно варьирует. Необходимо найти участок чешуи с одним слоем клеток (рис. 15). Во многих клетках хорошо видны призматические одиночные кристаллы (1) или сростки из 2-3 кристаллов оксалата кальция – двойные (2) и тройные (3) кристаллы.
Дата добавления: 2015-12-15 | Просмотры: 5029 | Нарушение авторских прав
|