АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Генетическое подтверждение существования терминаторных кодонов

Изучение rII -мутаций предоставило также генетические свидетельства в пользу существования кодонов, терминирующих синтез полипептидной цепи. Комплементационный анализ показал, что цистроны А и В кодируют две различные генетические функции. Это значит, что на границе между этими цистронами должны находиться определенные генетические «знаки препинания». Делеция такого пограничного участка приводит к слиянию неделетированных участков А и В в один общий цистрон. Так, делеция 1589 (рис. 12.2) приводит к возникновению rIIA мутанта, сохраняющего, несмотря на частичную делецию в В -цистроне, его функциональность, т.е. способность кодировать активный В-белок. Участок ß-цистрона, исчезающий при делеции 1589, содержит ту самую область, в которой картируются мутации FCO и ее производные. Это подтверждает сделанный в предыдущем разделе вывод о том, что данный участок B-белка не существен для проявления нормальной активности. Введение мутации со сдвигом рамки в неактивный A-участок слитых цистронов, образовавшихся в результате делеции 1589, нарушает и функциональную активность ß-участка. Следовательно, слитая мРНК имеет направление трансляции А ® В; считывание этой мРНК приводит к образованию одного слитого полипептида.

Аналоги нуклеиновых оснований, вызывающие мутации, отличные от сдвига рамки, также могут индуцировать такие мутации в A-участке «слитого» цистрона, которые влекут за собой потерю B-функции. Некоторые из этих мутаций, которые сводятся к замещению единичных нуклеотидов, принадлежат к классу супрессируемых летальных amber-му таций (см. гл. 7). Возможное объяснение природы влияния amber-мутации в Α-участке на экспрессию B-белка могло заключаться в том, что благодаря этой мутации возникает терминаторный кодон, предотвращающий трансляцию ß-участка слитой мРНК.

Прямое свидетельство в пользу того, что amber-мутации вызывают преждевременную терминацию трансляции, было получено при иссле-

Рис. 12.2. Делеция пограничного участка, расположенного между цистронами А и В rII -мутанта, удаляет последовательность, необходимую для независимой экспрессии двух различных генетических элементов, и приводит к образованию слитого Α-B цистрона. Отмечен размер участка, элиминируемого при делеции 1589.

Дата добавления: 2015-12-16 | Просмотры: 470 | Нарушение авторских прав