Образование коинтеграта с последующей сайт-специфической рекомбинацией. Обратите внимание на тандемное расположение двух элементов Tn3s. Что происходило бы при их
расположении в противоположной ориентации? Кольцевая ДНК делетируется из хромосомы.
Глава 15
15.1.
15.7. Культивирование Е. coli ( λ cItsN –O –) при 42°С приведет к инактивации репрес-
сора и соответственно транскрипции генов N и cro. Мутации N – и О – предотвратят протекание II стадии транскрипции и репликации ДНК. Таким образом, лизогены не погибнут. Транскрипция гена cro обеспечит наработку белка cro, который, связываясь с участком or, будет ингибировать трансляцию гена cIts. Такое состояние транскрипции должно поддерживаться при возвращении культуры к температуре 30°С. Клетки будут чувствительны к инфекции фагом λ, поскольку экспрессия гена cro препятствует экспрессии гена cIts, продукт которого необходим для установления иммунитета. Это состояние транскрипции, по всей видимости, не абсолютно стабильно и может «спонтанно» переключаться в режим «cI - включен, cro -выключен». Эта гипотеза о функциональной роли гена cro может быть проверена с помощью аналогичного эксперимента с изменением температуры культивирования на лизогенном штамме E. coli ( λ cItscro – N – О –). Если гипотеза правильна, то клетки будут вновь приобретать иммунитет к инфекции фагом λ вскоре после снижения температуры до 30°С. 15.9. lас -Репрессор построен из четырех идентичных субъединиц. Следует ожидать, что у частичного диплоида lacI + /1асIs белок будет существовать в форме гомо- и гетеротетрамеров I4+; I3+Is; I2+I2s; I + I3s; I4s. Если мономер Is не связывается с индуктором, а тетрамер в то же время сохраняет способность связываться с оператором, то фенотип доминантной суперрепрессии будет обусловлен необратимым связыванием молекул Is4 (и возможно, гетеротетрамеров) с операторной
