областью ДНК. Если за доминантную суперрепрессию ответственны главным образом тетрамеры Is4, то смещение относительного содержания различных гомо- и гетеротетрамеров в сторону значительного преобладания тетрамеров типа I+4 по сравнению с Is4 должно повлиять на уровень репрессии с восстановлением чувствительности к индукции. Эту гипотезу можно проверить с помощью введения в клетку гена lacI + с суперпродукцией репрессора и последующей проверки оперона на индуцибельность. 15.11. У фага λ поздние гены, включая ген R, находятся под контролем продукта гена Q, который обеспечивает возможность продления синтеза (при участии полимеразы хозя-
ина) молекул мРНК, индуцированных на p'R. Фаги 434 и λ обладают целым рядом общих генов, за исключением генов иммунитета и att -сайта. Инфекция лизогена по фагу 434 фагом λR– будет сопровождаться наработкой продукта гена Q фага λR–. Благодаря этому окажется возможной экспрессия гена R+ фага 434 за счет включения транскрипции поздних генов, которая инициируется на гомологичном промоторе p'R профага 434. Это явление было названо «трансактивацией». Достоверность интерпретации можно проверить с помощью инфекции фагом λR– штамма, лизогенного по фагу 434, также несущему мутантный ген R–. В этом случае лизис не должен наблюдаться.
Глава 16
16.1. Приводим перечисление основных этапов. Каждый из них под влиянием различных мутаций может претерпевать разного рода изменения. Определенные мутации могут полностью блокировать данный этап, а другие - лишь снижать эффективность образования конечного продукта - ß-глобулина.
16.5. В пользу этой гипотезы свидетельствует наблюдение об участии определенной последовательности ДНК, локализованной со. стороны 5' от гена hsp70 Drosophila, в ответе на тепловой шок в клетках млекопитающих, а также, вероятно, и в собственных клетках Drosophila. По-видимому, клетки млекопитаю-
щих располагают особыми регуляторными молекулами, которые активируются при тепловом шоке и могут узнавать данную последовательность ДНК. Существование такого рода общего регуляторного механизма можно рассматривать как свидетельство происхождения от общего эволюционного предшественника. 16.7. Трудности, связанные с использованием простого делеционного анализа для уяснения влияния данной последовательности ДНК на экспрессию прилегающего к ней гена, заключаются в том, что удаление определенной последовательности фактически приводит к ее замещению на другую, граничащую с ней последовательность. Эта последняя сама по себе может содержать участки, способные оказывать определенное влияние на экспрессию искомого гена. Ввиду этого интерпретация истинной роли делетированной последо-
16.3. Отчетливо наследуемый характер могут иметь лишь те механизмы регуляции экспрессии генов, которые связаны с изменением структуры ДНК. Известны два таких механизма: метилирование оснований и структурные перестройки последовательности ДНК.
вательности может оказаться весьма неоднозначной. Метод линкерного сканирования не полностью свободен от вышеупомянутого ограничения. В то же время для уяснения функциональной роли замещаемой последовательности этот метод следует признать более адекватным, поскольку он основан на замене природных последовательностей на стандартный фрагмент ДНК того же размера.
