Глава 8
8.7. Искомая мутация локализуется между генами sir и his. Работая со штаммом АВ313 и используя стрептомицин для селекции против родительских клеток Hfr, студент создал условия, в которых любая мерозигота, получившая аллель дикого типа по интересующей его мутации, получит одновременно и тесно сцепленный с ним аллель sir1. Поэтому большинство рекомбинантов, несущих аллель дикого типа по искомой мутации, окажутся стрептомицин-чувствительными и погибнут на содержащей стрептомицин селективной среде. По совету преподавателя, удалив стрептомицин из селективной среды, студент для селекции против родительских клеток Hfr может использовать потребность в аденине (Ade –). Для этих же целей он может воспользоваться также средой с аденином, применяя в качестве селектирующего агента фаг Т1. 8.9. 1) Клетки P в отличие от клеток F– чувствительны к инфекции РНК-содержащими фагами. 2) Клетки P легко передают селектируемые маркеры другим штаммам F–,
в то время как клетки F подобной способностью не обладают. 8.11.
8.13. Для появления стабильного трансдуктанта должны произойти два события: ДНК ara3+ должна проникнуть в клетку и вступить в рекомбинацию с клеточным геномом. Мельчайшие колонии возникают в результате абортивной трансдукции, при которой ДНК ara3+проникает в клетку, но не рекомбинирует с клеточным геномом. В результате ген ara3+не реплицируется и не передается всем дочерним клеткам. Образование таких микроколоний становится возможным за счет экспрессии полученного гена ara3+, обеспечивающей клетку, несущую этот ген, ферментом, необходимым для утилизации арабинозы в качестве источника углерода. Такая клетка может расти и подвергаться делению с образованием дочерних клеток, рост которых останавливается из-за отсутствия у них гена ara3+. 8.15. В этих экспериментах не осуществляется целенаправленное прерывание конъюгации. При спонтанном прерывании возникает градиент переноса маркеров с убыванием частоты переноса по мере удаления от точки начала переноса. Порядок: