Обнаружение действия пероксидазы (качественно)
Источником пероксидазы служит водный экстракт из хрена, капусты, репы, брюквы, мышечной ткани, а источником окисляемого соединения - гваяковая смола, содержащая полифенол - пирокатехин.
Реакция идет по следующей схеме:
Н
½
| | | | Н
½
| С
// \
| | | | С
// \
| Н¾ С С ¾ ОН Н ¾ О
½ || + ½
| пероксидаза ¾¾¾¾¾¾¾>
| Н¾ С С = О
½ | + Н2О
| Н¾ С С ¾ ОН Н¾ О
\\/
С
| | Н¾ С С = О
\\/
С
| ½
Н
| | | | ½
Н
| пирокатехин о - бензохинон
(бесцветный) (синий)
Ход работы. В одну пробирку вносят 2 мл экстракта из хрена или мяса; во вторую пробирку - 2 мл прокипяченного экстракта из хрена. В каждую пробирку добавляют по 2 капли 1 % - ного раствора гваяковой смолы (или 0,02 М пирокатехина) и отмечают окрашивание получившихся растворов. В каждую пробирку добавляют по 1- 2 капли 3 % - ной Н2О2. Отмечают изменение окраски в пробирках.
Результаты опыта оформляют в виде таблицы 4 и делают выводы.
Таблица 4-Основные параметры опыта и его результаты
№ опыта
| Субстрат
| Фермент
| Тип кализиру- емой реакции
| Условия проведения опыта (toС, рН, добавление др. реагентов)
| Наблюде-ния
|
|
|
|
|
|
|
Материалы и реактивы: экстракт из хрена или вытяжка из мяса (см. Приложение В, п. 9); 1 % - ный раствор гваяковой смолы в этаноле или 0,02 М раствор пирокатехина; 3 % - ный раствор Н2О2.
Оборудовани:. пробирки; пипетки.
Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 618 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 |
|