Обнаружение действия фенолоксидазы (качественно)
Фенолоксидаза катализирует окисление полифенолов с участием кислорода воздуха как акцептора водорода.
Источником фенолоксидазы служит картофель, гваяковая смола содержит субстрат полифенолпирокатехин. При действии фенолоксидазы на пирокатехин получается продукт окисления о - бензохинон, окрашенный в синий цвет. Реакция идет по следующей схеме:
Н
½
| | | | Н
½
| С
// \
| | | | С
// \
| Н¾ С С ¾ ОН
½ || + 1/2 О2
| фенолоксидаза ¾¾¾¾¾¾¾>
| Н¾ С С = О
½ | + Н2О
| Н¾ С С ¾ ОН
\\/
С
| | Н¾ С С = О
\\/
С
| ½
Н
| | | | ½
Н
| пирокатехин (бесцветный) о - бензохинон (синий)
| | Ход работы. На разрезы сырого и вареного картофеля наносят по 1-2 капли 1 % - ного спиртового раствора гваяковой смолы (0,02 М раствора пирокатехина) и отмечают появление окраски на одном из срезов картофеля. Отмечают разницу в окраске на срезах. Результаты опытов оформляют в виде таблицы 5 и делают выводы.
Таблица 5 - Основные параметры опыта и его результаты
№
опыта
| Субстрат
| Фермент
| Тип кализиру- емой реакции
| Условия проведения опыта (toС, рН, добавление др. реагентов)
| Наблюде-ния
|
|
|
|
|
|
| Материалы и реактивы: картофель сырой и варенный; 1 % - ный раствор гваяковой смолы в этаноле или 0,02 М раствор пироктехина.
Оборудование капельницы.
Определение активности о - дифенолоксидазы (полифенолоксидазы)
Дата добавления: 2015-08-06 | Просмотры: 741 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 |
|