Повышение концентрации ПВК в крови и моче наблюдается при гиповитаминозе В1, при воздействии на организм промышленных ядов, блокирующих SH-группы тиоловых ферментов, паренхиматозных заболеваниях печени, тяжелой сердечной недостаточности, гипоксических состояниях, острых инфекционных заболеваниях, инсулинзависимом сахарном диабете, диабетическом кетоацидозе, гепато-церебральной дистрофии, акродинии, мышечной дистрофии и др. заболеваниях. Наиболее резкое повышение ПВК в крови отмечается при интенсивной мышечной работе и гиповитаминозе В1.
Одной из причин накопления ПВК является торможение процесса ее окислительного декарбоксилирования в митохондриях клеток.
Витамин В1 входит в состав кофермента тиаминдифосфата, который является простетической группой первого фермента пируватдегидрогеназной системы – пируватдегидрогеназы. При недостаточности этого витамина, а также при нарушении его обмена наблюдается снижение интенсивности окислительного декарбоксилирования ПВК. Введение пациенту препарата витамина В1или тиаминдифосфата с фармакопейным названием кокарбокси-
лаза – наоборот, стимулирует процесс аэробного метаболизма пиру-
вата и повышает энергообеспечение клеток.
В состав пируватдегидрогеназной системы входят тиоловые ферменты – дегидрогеназы (пируватдегидрогеназа и дигидролипо-
илдегидрогеназа) и коферменты, содержащие SH-группы (липоевая кислота и HS-коА), поэтому пируватдегидрогеназная система блоки-
Пируватдегидрогеназная система работает только в аэробных условиях, поэтому ПВК накапливается в тканях и при гипоксии.
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПВК
Существуют несколько методов количественного определения пировиноградной кислоты в тканях и биологических жидкостях.
1. Определение ПВК в крови колориметрическим методом.
Принцип метода см. в разделе «Лабораторная работа».
При анализе используют 0,2 мл крови из пальца.
Нормальные значения: 0,03 – 0,10 ммоль/л.
2. Энзиматический метод определения ПВК в крови (и в тканях экспериментальных животных).
Принцип метода. В присутствии фермента лактатдегидрогеназы пируват восстанавливается до лактата в реакции:
СOO- COO-
С=О + НАДН + Н+ 0 CH-ОН + HAД+
СН3 CH3
пируват лактат
Количество используемого в реакции пирувата эквивалентно количеству восстановленного кофермента НАДН + Н+ , убыль которого регистрируют спектрофотометрически при длине волны l=340 нм.
В клинике для анализа используют 1 мл венозной крови.