АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Серодиагностика и ретроспективная диагностика

РДП. Реакция нашла широкое применение в бывшем СССР. Она выявляет AT к вирусу в сыворотке крови при остром, хроническом и латентном течении инфекции. Помимо селе­зенки от больных животных в качестве АГ можно использовать вирус ИНАН, культивируе­мый в культуре лейкоцитов лошадей и инактивированный твином-80 и эфиром. В СНГ да РДП биопромышленность выпускает диагностикум.

РСК. Одна из первых серологических реакций, предложенных для диагностики ИНАЯ Японскими исследователями показано, что вирус, полученный в культуре лейкоцитов, мож­но использовать в качестве АГ в РСК с сыворотками больных ИНАН лошадей КСА появ­лялись у 79,1% экспериментально зараженных лошадей через 17-40 дн. после введения им вируса, у 78,2% - через 7-20 дн. после появления первой температурной реакции, у некото­рых больных лошадей титр AT возрастал непосредственно перед температурной реакцией или сразу после нее AT в крови больных лошадей обнаруживали от 2 до 60 дн. Вторично 1 крови больных они не выявлялись.

РТГА. В отличие от РДП РТГА - более простой метод количественного определения AT к вирусу ИНАН. Авторы обнаруживали анти-ГА в крови жеребят одновременно с AT, выяв­ляемыми в РДП. РТГА проводили в объеме 0,1 мл с 0,2%-ной взвесью эритроцитов морской свинки и 4 ГАЕ вируса. Перед постановкой ее сыворотки прогревают и адсорбируют активированным углем. В качестве АГ служит концентрированная вируссодержащая культуральная жидкость. Для культивирования вируса используют субкультуру кожно-мышечной ткани эмбриона лошади.

НИФ. Установлена возможность использовать ее для определения AT к вирусу ИНАН 5-го дня после заражения монослоя дермальных клеток очаги концентрации АГ в виде ярких пятен флюоресценции располагались внутри цитоплазмы в околоядерной области и мели диаметр 0,5-3 мкм. Тест ИФ выявляет более низкие уровни AT, чем РДП.

ELISA. Разработан ELISA с очищенным вирусньм протеином Р26 в качестве АГ с онъюгатом, реагирующим с IgG лошадей Источником вируса служит сокультура перевиваемой линии дермальных клеток лошади, персистентно инфицированная вирусом, и клеток почки эмбриона лошади. Обработка АГ в аффинной хроматографии позволяет освободиться от появления неспецифических линий преципитации в РДП и повышает специфичность. Сказался более чувствительным и эффективным по сравнению с РСК и РДП Титр AT, выявляемый методом, был в 1-2 тыс раз выше, чем в РДП, и в 4 раза выше, чем в РСК. Наибольшая корреляция между 2-мя тестами отмечена на 21-й день и позднее после поражения AT в ELISA удается обнаружить через 1-4 г после заражения. Метод предложено использовать и для определения вирусного АГ, а также для оценки качества вакцин. С 1983 г. в США диагностика ИНАН осуществляется конкурентным ИФА.

Дифференциальная диагностика. При постановке диагноза на ИНАН следует исключить пироплазмоз, нутталиоз, трипаносомоз, лептоспироз, грипп, ринопневмонию. Для пироплазмоза характерна сезонность: апрель-май или август-сентябрь. Болезнь протекает остро, при исследовании крови обнару­живают пироплазмы. При нутталиозе максимум больных выявляют в июне. Болезнь проте­кает остро и подостро. В крови находят нутталии. У лошадей, больных гемоспоридиозами, наблюдается резкая желтушность слизистых оболочек, имеющая стойкий характер, при ЖАН она отсутствует. При гемоспоридиозах с первых же дней наблюдается резкое учаще­ние дыхания - одышка (отек легких), у больных ИНАН со стороны органов дыхания, как правило, особых отклонений от нормы нет Наконец, при гемоспоридиозах у жеребят бо­лезнь протекает латентно, а при ИНАН - тяжело, сопровождаясь высокой смертностью. Леп­тоспироз исключается на основании исследования сывороток крови больных по реакции микроагглютинации и лизиса, отсутствия лейкоцитоза и наличию лептоспир в моче Болез­ни вирусной этиологии (грипп, ринопневмония) отличаются от ИНАН высокой контагиозностыо, быстрым распространением, коротким течением При диагностике этих болезней применяют лабораторные методы выделение вируса на КЭ и культурах клеток и дальнейшая их идентификация в серологических реакциях. Характерным симптомом гриппа лоша­дей является сухой резкий кашель, вирус ринопневмонии вызывает у жеребых кобыл абор­ты во второй половине жеребости Однако отличием абортов, вызванных вирусом риноп­невмонии, является отсутствие повышения температуры тела в день аборта и после него. Аборты, причиной которых служит ИНАН, происходят во время лихорадки или выражен­ной анемии и истощения.

Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 963 | Нарушение авторских прав