АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Индикация и идентификация вируса. ИФ. Её используют для быстрой индикации и идентификации АГ ВИГС в культуре кле­ток, инфицированных вирусным материалом

ИФ. Её используют для быстрой индикации и идентификации АГ ВИГС в культуре кле­ток, инфицированных вирусным материалом, а также мазках-отпечатках, гистологических срезах патологического материла (фрагментов тонкого кишечника) от животных, естествен­но-больных или заболевших после экспериментального заражения. РИФ применяют в пря­мом и непрямом вариантах по общепринятым методикам. ИФ считается положительной при наличии в препаратах ярко-зеленого свечения клеток или цитоплазмы с ярко светящимися гранулами разного размера при отсутствии флюоресценции в контрольных препаратах. Свечение лейкоцитов и дегенеративно измененных клеток не учитывается. Выявление виру­са может быть успешным, если исследования проводятся на поросятах не поздн.ее чем через 24 ч после их заболевания. Наибольшее количество флюоресцирующих эритроцитов обнаруживают до и с наступлением диареи, позже число их невелико. Наиболее эффективным методом диагностики болезни оказалось исследование в РИФ замороженных срезов тощей кишки животных, убитых в период острой фазы заболевания. Одн.ако, по мнению других исследователей, метод мазков-отпечатков миндалин с помощью прямой РИФ превосходит исследования тощей кишки.

Для ИФ диагностики ИГС применяли меченый конъюгат против вирусного перитонита кошек. Такие конъюгаты готовили из перитонеальной жидкости больной кошки с титром AT в жидкости не ниже 1:2560. Конъюгат анти-ВИГС получают из иммунной сыворотки поросят, свободн.ых от патогенной микрофлоры, титр AT 1:256. При исследовании срезов слизистой оболочки тонкого кишечника поросят, зараженных вирусом, получены одинако­вые результаты с конъюгатом анти-ВИПК и анти-ВИГС равной интенсивности свечения. При исследовании с помощью конъюгата анти-ВИГС срезов селезенки кошек, зараженных ВИПК, получены отрицательные результаты. Это свидетельствует об одн.остороннем анти­генном родстве между этими вирусами. Таким образом, для диагностики ИГС можно с ус­пехом использовать конъюгаты анти-ВИПК. Поскольку наличие у кошек AT к вирусам сви­ней маловероятно, перитонеальная жидкость, полученная при заражении вирусом перитони­та, может служить хорошим препаратом для изготовления диагностического конъюгата. Конъюгаты к ВИГС, полученные из иммунной сыворотки поросят, могут давать неспецифи­ческую флюоресценцию.

Для диагностики ИГС ИФ в качестве источника AT предложено иммунное молозиво. Показано, что концентрация иммуноглобулинов в молозиве даже выше, чем в сыворотке крови. ИФ как метод диагностики имеет ряд проблем, главная из которых наличие перекре­стной реакции с ВИПК, КВС и РКВС. Поликлональные AT не дифференцируют ВИГС и РКВС, некоторые монАТ реагируют с ВИГС и не реагируют с РКВС. Такая дифференциа­ция может быть проведена как в ИФ, так и в ИФА (52, 111). РКВС обнаруживается в респи­раторных тканях и эпителиальных клетках носовой полости, но тем не менее для дифферен­циации необходимо использовать монАТ, поскольку ВИГС может также реплицироваться в указанных органах.

РН. При выделении вируса в культуре клеток его идентификацию проводят с помощью РН, используя 1000 ТЦДзо вируса и 20 нейтрализующих доз сыворотки. Помимо культуры клеток для идентификации вируса, изолированного в биопробе, ста­вят РН на восприимчивых поросятах в возрасте 1-5 дн..

ВИЭОФВ. Вирус ИГС образует 1-2 линии преципитации с гомологичными сыворотками и может быть легко выявлен в экстрактах из содержимого кишечника экспериментально зараженных поросят. Богатая АГ структура (наличие трех АГ с различ­ной электрофоретической подвижностью) позволила использовать для его обнаружения мо­дифицированную методику ВИЭОФ (двойной ВИЭОФ), повышающую результативность.

Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 639 | Нарушение авторских прав