АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Метод иммуноферментного анализа

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) во многом напоминает РИА, но включает использование коммерческих реагентов — Аг или АТ, маркированных ферментами (например, пероксидазой или щелочной фосфатазой). После образования иммунного комплекса в систему вносят субстрат, расщепляемый ферментом, что приводит к окрашиванию среды — в жёлто-коричневый (при использовании пероксидазы) или жёлто-зелёный (при использовании фосфатазы). По сравнению с классическими методами выявления Аг, ИФА позволяет непосредственно регистрировать взаимодействие Аг с АТ в специфической фазе, а не анализировать вторичные проявления взаимодействия — агглютинацию, преципитацию или гемолиз. Метод отличает высокая чувствительность — обычно достаточно присутствия Аг в концентрации 1 нг/мл. К настоящему времени созданы многочисленные модификации базовой методики. Наибольшее распространение получил гетерогенный ИФА на твёрдой фазе (твердофазный ИФА). Для этого коммерческие моноклональные АТ или Аг фиксируют на лунках пластиковых панелей, куда затем вносят исследуемый материал (содержащий Аг или АТ). Основные варианты твердофазного ИФА представлены на рис. 10 – 19. На практике ИФА широко применяют для выявления Аг Chlamydia trachomatis в мазках из мочеиспускательного канала и влагалища, стрептококков группы А в мазках из зева и токсина Clostridium difficile в фекалиях. Метод позволяет не только выявлять АТ, но и определять их принадлежность к различным классам Ig, например, выявлять IgM к Аг Mycoplasma pneumoniae.

Ы Вёрстка. ВВести рисунок 10–19

Рис. 10 – 19. Схема выявления Аг прямым и непрямым методами твердофазного ИФА.

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 462 | Нарушение авторских прав