Реагенты и расходные материалы.
1. Техпластин(К) - лиофильно высушенная тромбопластин-кальциевая смесь, на 5,0 мл суспензии во флаконе для 25 дублированных определений.
МИЧ Техпластина (К) в разных сериях составляет 1,1 или 1,2.
2. Растворитель для Техпластина(К), 10,5 мл в 1 флаконе.
3. Контрольная нормальная плазма - лиофильно высушенный пул плазмы крови, полученной не менее, чем от 20 здоровых людей (на 0,4 мл в 1 флаконе).
4. Цитрат натрия 3-х замещенный - по 5 мл 3,8% раствора в 2 флаконах.
5. Спирт этиловый 70°.
6. Скарификаторы, стерильные, одноразовые.
Оборудование:
1. Коагулометр двухканальный шариковый «Тромбостат-2»;
2. Капилляр Панченкова;
3. Микропипетки вместимостью по 0,1 мл;
4. Пипетки вместимостью по 5,0 мл;
5. Пробирки стеклянные;
Получение "капиллярной" крови для исследования:
1. Капилляр Панченкова промывают 3,8% раствором цитрата натрия;
2. В капилляр набирают 3,8% раствор цитрата натрия др деления «80»;
3. После обработки кожи спиртом и ее осушения, прокалывают кожу мякоти пальца скарификатором. Первую каплю крови удаляют сухим ватным тампоном;
4. В тот же капилляр набирают кровь, доводя общий объем до деления «0»;
5. Полученную смесь крови и цитрата переносят в чистую пробирку;
6. Затем в тот же капилляр дополнительно набирают кровь до деления «20».
7. В пробирке смешивают обе порции полученной кров», дополнительно перемешивая их пипетированием. При этом получают кровь, стабилизированную 3,8% раствором цитрата натрия в отношении 9:1.
До проведения исследования образцы крови хранят при комнатной температуре (+18...+25°С) не более 60 мин в герметично закрытом виде для предотвращения потери объема за счет высыхания. При заборе крови из пальца следует избегать ее выдавливания, поскольку это увеличивает поступление в капиллярную кровь тканевой жидкости, что влияет на результаты анализа.
Ход определения:
Исследуемый образец "капиллярной" крови в объеме 0,1 мл, внесенный в кювету вместе с шариком, инкубируют 1 мин в термостатируемых лунках коа-гулометра при +37°С. Затем в кювету вносят 0,1 мл тромбопластин-кальциевой смеси (Техпластина-К) той же температуры и немедленно включают таймер. Определяют время свертывания. Исследование каждого образца крови проводят дважды. Из двух определений вычисляют средний результат протромби-нового времени (в сек), если разброс результатов не превышает 10%. В противном случае исследование повторяют. Аналогично исследуют "капиллярную" кровь, стабилизированную цитратом натрия, взятую у практически здорового человека.
Для получения контрольных результаты протромбинового времени можно также использовать входящую в состав набора контрольную нормальную плазму. Для этого 0,1 мл плазмы, входящей в состав набора, прогревают в течение 1 мин при температуре +37°С. Затем добавляют 0,2 мл прогретой до +37°С тромбопластин-кальциевой смеси, включают секундомер и определяют время свертывания.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 493 | Нарушение авторских прав
|