Базисная методика лабораторного контроля за терапией АНД
Лечебно-профилактическое применение варфарина нуждается в систематическом лабораторном контроле.
Основным методом такого контроля является протромбиновый (тромбо-пластиновый) тест, выполняемый по методике Квика (1937) в соответствии с рекомендациями ВОЗ (1981, 1999). Однако в методику проведения этого теста и в оценку его результатов в последние годы внесены большие изменения, в связи с чем ранее применявшаяся и, к сожалению, еще широко принятая и поныне во многих лечебных учреждениях РФ методология, основанная на определении так называемого протромбинового индекса (в %) с использованием случайных образцов нестандартизированного по чувствительности тромбопла-стина является порочной, не позволяющей правильно дозировать и контролировать эффекты АНД. Обусловлено это тем, что разные коммерческие образцы тканевого тромбопластина (ТТ), являющегося основным реагентом при определении протромбинового времени, обладают неодинаковой чувствительностью к действию АНД, в частности - варфарина. Поскольку же эта чувствительность может варьировать в очень больших пределах, результаты ПТ могут существенно отличаться друг от друга при повторном выполнении теста с разными образцами одного и того же тромбопластина, а также при использовании нестандартизированных тромбопластинов разных серий.
В связи с этим потребовалась стандартизация тромбопластинов по чувствительности к действию АНД. Такая стандартизация по «индексу чувствительности» (ISI или МИЧ) проводится фирмами-изготовителями по одному из международных эталонов (RBT/90, ВСТ/253 и др.). Этот индекс чувствительности, если он определен, указывается на упаковке реагента и в инструкции к выпускаемому тромбопластину. На основании величины МИЧ вносится существенная поправка в показания протромбинового теста.
В настоящее время такие стандартизированные тромбопластины выпускаются уже несколькими отечественными фирмами, в том числе фирмой «Технология-Стандарт» (Барнаул). Использование стандартизированного
тромбопластина в ПТ, сводит до минимума разброс показаний этого теста при повторных исследованиях. Поправка на МИЧ вносится в расчет результатов ПТ (см. ниже). Желательно, чтобы МИЧ используемого тромбопластина был не выше 1,5, т.е. не более, чем в полтора раза превышал индекс чувствительности эталонного образца, МИЧ которого близок к 1,0. Реагенты, производимые на Алтае имеют МИЧ в пределах 1,1-1,2.
Помимо стандартизации по МИЧ, тромбопластиновый регент должен быть растворимым, т.е. приготавливаться без эмульгирования сухого вещества в дистиллированной воде или в 0,277% растворе хлорида кальция, поскольку при разной интенсивности растирания и измельчения нерастворимого реагента меняется конечная его активность. Поэтому хорошая растворимость тромбопластина - важная характеристика этого реагента, позволяющая получить стабильные результаты ПТ.
Рекомбинантные тромбопластины, которые пока в Российской Федерации не производятся, помимо хорошей стабильности по активности безопасны по возможной вирусной контаминации.
В целом, следует еще раз подчеркнуть, что все еще используемый во многих лабораториях нерастворимый кадаверный тромбопластин, лишенный маркировки по МИЧ и имеющий обычно заниженную активность (16-20 с в ПТ), не соответствует требованиям, предъявляемым к реагентам для контроля за лечебным применением АНД.
Варианты определения показаний протромбинового теста
Определение показаний ПT может выполняться по классической методике на образцах нитратной плазмы, а также на цельной крови, получаемой из прокола кожи на пальце. Последняя методика, разработка и усовершенствование которой выполнено в нашем центре, имеет следующие три очень существенных преимущества:
1. Она позволяет избежать повторного травмирования вен иглами, используемыми для получения крови, что особенно важно при исследовании больных с высокой наклонностью к тромбозам.
2. Исследование цельной крови, полученной из пальца упрощает и ускоряет определение протромбинового времени, т.к. не требует центрифугирования стабилизированной цитратом крови и выделения из нее плазмы.
3. Методика исследования «капиллярной» крови делает более доступным определение ПТ не только в крупных лечебных учреждениях, но и в малых контрольных лабораториях.
Вместе с тем, определение ПТ на цельной капиллярной крови требует использования коагулометров механического (шарикового) типа, что в то же время устраняет элемент субъективизма при оценке результатов теста, нивелирует разную подготовленность лаборантов к выполнению ПТ, не зависит от остроты зрения исследователя.
Ниже будут приведены данные о выполнении ПТ на плазме и в цельной капиллярной крови, начиная с подготовительной процедуры к обоим вариантам методики.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 602 | Нарушение авторских прав
|