АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Определение антиоксидантной активности напитков по DPPH методу

Одним из способов оценки антиоксидантной активности является колориметрия свободных радикалов, основанная на реакции DPPH (2,2-дифенил-1-пикрилгидразил), растворенного в метаноле, с образцом антиоксиданта (АН) по схеме:

DPPH* + AH → DPPH-H + A*.

В результате восстановления DPPH(C18H12N5O6, M.М. 394,33) антиоксидантом снижается пурпурно-синяя окраска DPPH в метаноле, а реакция контролируется по изменению оптической плотности при 517 нм методами спектрофотометрии.

Цель работы: определить антиоксидантную активность напитков.

Приборы и посуда:

- спектрофотометр,

- кюветы,

- пробирки,

- пипетки 2 см³

Реактивы:

- этиловый спирт, 96 %,

DPPH реактив концентрацией 2*10^-4 М.

Материалы:

исследуемые напитки.

Методика проведения работы:

Напиток, если необходимо, освобождают от диоксида углерода.

2 мл освобожденного от диоксида углерода напитка смешивают с 2 мл DPPH реактива и тщательно перемешивают.

Для сравнения готовится раствор, состоящий из 2 мл DPPH реактива и 2 мл 96% этилового спирта.

Спектрофотометр настраивается на ноль по спирту. Определение проводится через 30 мин после приготовления необходимых растворов на спектрофотометре при длине волны 517 нм. Определение производится каждые 15 минут в течение часа.

Антиоксидантная активность (АА) выражается в единицах активности (ед.акт.) и вычисляется по формуле.

АА= [1 – (Аi-Аj) / Ac] × 100,

где Аi – антиоксидантная активность исследуемого раствора с DPPH реактивом;

Aj – антиоксидантная активность раствора DPPH в этаноле для определения размеров поглощения на длине волны;

Ac –антиоксидантное поглощение DPPH раствора.

Далее строится калибровочная кривая (рис.4.2) (время определения, мин; антиоксидантная активность, ед.акт.). Антиоксидантная активность исследуемого раствора определяется по графику при длительности реакции 30мин. Погрешность метода составляет 5%.

Рис 4.1. Калибровочная кривая антиоксидантной активности

Дата добавления: 2015-10-11 | Просмотры: 1674 | Нарушение авторских прав