АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Трансдукция у бактерий. Использование трансдукции для картирования бактериальных генов.

Транс-ия-перенос генов из одних бакт кл в др с пом-ю бактериофага.В1952 Циндер и Леберберг описали еще один способ передачи генетич информ-и ДНК у бакт.Иногда поражая бакт-ю фаг встраивается в ДНК кл хозяина и в теч длит-го врем передается из одного поколения в др.При изменении условий ДНК фага может вырезаться из ДНК хозяина.При этом фаговые частицы могут случайно захватывать хромосомы кл хозяина и переносить вместе с ними гены из 1ой бакт кл в др.-трансдукция.

Исследования проводили на на бакт мышиного тифа.В у-образную трубку с бактериальным фильтром посередине высевали на полную 2 штамма бакт 22А(Т-) и 2А(Т+).Через некот вр после их совместного выращивания в у-образной трубке штаммы высели на минимальную пит среду на кот 22А(ауксатрофный штамм) не рос,но дал небольшое кол-во колоний,преобретя способность синтезировать триптофан.Переход бакт из одного калена трубки в др исключался,т к посередине трубки стоял бакт-ый фильтр.Обратноя мц 22А->2А(Т- ->Т+)также исключалась,т к штамм 22А был стабильным в этом отношении.По мнению исследователей участок ДНК содер-й норм ген триптофана был принесен из кл-к 2А в кл-и 22А с пом-ю фага.Последний анализ показал,что штамм 2А оказася лизогенным по фагу,кот из умеренного превращ-я в паразитический и при заражении новых бактерий переносит в них часть фрагмента ДНК с гена контрол-й синтез триптофана.Этот тип трансдукции получил название общей трансдукции,тк фаг 22А внедрялся в разные участки хромосом реципиентов.Внедрение фага в строго определенные места хромосомы бакт-и наз ограниченной трансдукцией.Если фрагмент ДНК(ген) кл донора перенес-й фагом в новую бакт-ю кл не включ в её хромосому но проявляется то такой вид трансдукции наз обартивной.

Для рекомб-го картирования необ-ма кл реципиента с кольц ДНК-хромосомой и ДНК донорной кл.ДНК кл донора ввод-ся в кл рецип разли-ми способами: с пом Нfr-хромосомы при коньюгации,вместе с фагом-вектором при трансдукции или путем прямой передачи ДНК при трансформации.Затем определ-я частота рекомбинации и строится генет карта данного участка бакт хромосомы.

37. Конъюгация бактерий. Контроль половой дифференцировки бактерий. F-фактор – генетический элемент, определяющий пол у бактерий. Репликация F-фактора. Коньюгация-непосредственный контакт меж кл-и бакт сопроважд-й переносом ген-го материала из кл донора в кл реципиента.Проц.коньюг-я был открыт в 1946 Ледербергом и Татум у E.Coli.Это стало возможным после разработки селективных сред и получения биохим мутантов.Обнаружили конью-ю с пом-ю чисто генного метода,т е путем получения рекомбинантных кл бакт-й.Спустя некоторое время 1952 Кейс выяснил,что рекомбинация проходит только в кл реципиентов, кот обозначали как женский штамм F-,а кл F+ доноры передают генетт-й материал в кл F-. В1958 Андерсан доказал это прямым методом наблюдая конь-ю в микроскоп.Кл F- и F+ отлич-я по форме. F- кругые, F+ продолговатые.Изолируя эти кл после конь-ции рекомбинанты появл-я в потомстве F- кл. Контроль половой дифференцировки бакт-й: F-фактор,гене-й элемент определяющий пол у бакт.. F-это половой фактор от англ плодовитость.Изучение штаммов E.Coli выявило у бакт половой диф-ки.У E.Coli выявили 2 половых типов F- и F+,было установлено,что кл F+ содержат F-фактор кот явл эписомой.В кл-х F- F-фактор отсутствует.В геноме F-фактора обнаружены гены ответс-е за синтез белка(пили(трубочек)).Пили распологаются на поверх-ти F+ кл,а на пов-ти F- кл имеются соответ-е рецепторы(это приводит к образ-ю меж ними цитоплаз-го мостика,где через этот мостик F-фактор переходит в бакт-ю кл-у реципиента. F-фактор имеет кольцевую форму и явл самостоятельным репликоном..При размножении бакт. F-фактор реплицируется как обычная кольцевая мол ДНК образуя тетаобразные фигуры в качестве промежуточного продукта репликации.При тетатипе репликации кольцевой хромосомы в определ точки хромосомы,кот. Наз ориджин(начало) возникает 2 репликативные вилки перемещ-ся в противоположных направлениях до тех пор пока не встретятся в точке терминации(ter C).В результате появл-я 2 мол кольцевой ДНК.При этом в процессе репликации промежут ф-ма похожа на греческую букву тета.Иногда F-фактор может принимать и линейную ф-му.Это проис-д если м\у F+иF- кл-и образ-я цитоплаз-й мостик и одна из цепей ДНК F-фактора переходит в кл F-,превращая её в кл F+. F-фактор реплицируется в этом случае по сигматипу\ по типу котящегося кольца.Проц идет так: в одну из цепей мол ДНК(кольц) происх разрыв,в др остается целой.На ней синтезируется дочерняя цепь ДНК и обр-я новая мол ДНК.Освобожд-я матер цепь ДНК принимает линейную форму,переходит по цитоплаз-му мостику в кл F- и там реплицируется,а затем свободные концы соед-я с пом ДНК-лигазы,и мол принимает форму кольца.Репликация F-фактора по сигма типу приводит к переносу его копии в F- кл,превращ её в F+ кл-у.Таким обр-м в кл-е реципиенте может происходить рекомбинация,т к F-фактор может нести бактериальные гены.

Дата добавления: 2015-12-16 | Просмотры: 903 | Нарушение авторских прав